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脊髓腔注射Orexins在術後疼痛動物模式之研究

為了解決脊髓灰質中自主神經系統的交感神經之節前神的問題，作者周長志 這樣論述：

中文摘要 Orexins或稱hypocretins是在下視丘( hypothalamus)胜肽類的新家族，有兩個成員， orexin A( hypocretin- 1)和是orexin B( hypocretin- 2)。Orexin A是由33個胺基酸序列組成，orexin B則是由28個胺基酸序列所組成。Orexin A以及orexin B的胺基酸序列的同源相似性為46%。 Orexins受體屬於一種G蛋白質偶合孤兒受體( G- preotein coupled orphan receptors)，可分為二型， OX1R以及O

X2R。Orexin A以及orexin B對這二型受體的選擇性不完全相同。OX1R對orexin B的親和力較orexin A差，然而，OX2R對orexin A以及orexin B的親和力則相似。由於含有orexins的神經元主要位於下視丘，因此，orexins可能參與許多由下視丘調節的生理作用包括：覺醒，進食，促進活動力以及活化自主神經功能。 由於富含orexins的神經纖維佈達中腦導水管週邊灰質和脊髓的laminae I，因此，oreixns被認為可能與疼痛調節有關。果真在2001年，有報告指出自中樞腦室或全身性投予orexin A具有止痛作用。因此，我們更進一步以

脊髓腔投予orexin A以及orexin B，在術後疼痛動物模式研究orexins於脊髓層級的止痛作用。 脊髓腔注射orexin A( 0.03- 1 nmol)以及orexin B( 0.1- 3 nmol)後，減低劃刀受傷引起的觸痛反應，該止痛作用具有劑量依賴性，ED50s分別為0.059 nmol以及2.5 nmol。合併注射orexin A專一性抗體( 1 : 500/ 5 mL)可以完全阻斷orexin A產生的止痛作用。合併注射orexin B專一性抗體(0.05- 0.1 mg)也可以完全阻斷orexin B產生的止痛作用。SB- 334897(專一性OX1

receptor 拮抗劑) 30 nmol可以完全阻斷0.3 nmol orexin A產生的止痛作用，但是只減弱0.3 nmol orexin B產生的止痛作用，將SB- 334897劑量增加至100 nmol也沒有辦法完全阻斷0.3 nmol orexin B產生的止痛作用。Naloxone(鴉片受體拮抗劑)並沒有影響orexin A以及orexin B產生的止痛作用。Suramin( P2x受體拮抗劑)( 30- 90 nmol)減弱orexin A產生的止痛作用，對orexin B的止痛作用幾乎達到完全阻斷的效果。Strychnine在不引起類癲癇性發作的劑量( 1 mg)下，可以拮

抗orexin B產生的止痛作用。 在閾值較高的動物，脊髓腔單獨注射orexin A抗體( 1: 500/ 5 mL)、orexin B抗體(0.05 mg)、SB- 334867( 30- 100 nmol)、suramin( 30- 90 nmol)或是strychnine(1 mg)，會增強觸痛反應。因此，我們推測在劃刀受傷後，有內生性orexins釋放作用在脊髓的OX1R受體，產生某寵程度的止痛作用，可能是動物體受傷後體內自我保護的一種內生性止痛作用。 脊髓腔注射orexin A之後10分鐘之內，可以明顯地觀察到凸眼現象，脊髓腔注射orexin

B則不明顯。凸眼現象可以被orexin A抗體( 1: 500/ 5 mL)完全阻斷，但是不受naloxone( 50 mM)或SB- 334867( 30 nmol)影響。當SB- 334867劑量增加到100 nmol時，凸眼的發生僅延遲並沒有辦法完全阻斷與縮短其表現時間。Suramin( 30- 90 nmol)也僅稍微延遲凸眼的發生與縮短表現時間，並沒有辦法完全阻斷。事先腹腔注射guanethidine 5天，可以防止脊髓腔注射orexin A產生的凸眼現象。我們推測凸眼現象是因為脊髓腔注射orexin A，活化脊髓內上頸椎交感神節節前神經元，進而興奮上頸椎交感神經節，再進一步興奮支配

superior 以及inferior palpebral smooth muscle of Müller的交感神節節後神經末梢所致。 總結本論文研究，我們發現脊髓腔注射orexins可以減緩刀傷造成的觸痛，orexin A的止痛作用是經由作用於OX1R而來，與鴉片系統無關。而除了OX1R有參與之外，orexin B的止痛作用也有可能作用在OX2R所致。Orexins的止痛作用可能經由P2x受體而活化glycinergic抑制性神經元所致。此外，我們也發現動物受劃刀傷害之後，可能釋放內生性的oreinxs，作用在脊髓內OX1R以產生止痛的自我保護作用。