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國立彰化師範大學 生物學系 賴吉永所指導 林怡萱的 蟻巢傘菌漆氧化酶基因在嗜甲醇酵母系統中的表達 （2021），提出亞硝酸鈉sds關鍵因素是什麼，來自於蟻巢傘菌、漆氧化酶、嗜甲醇酵母。
而第二篇論文國立臺北科技大學 化學工程與生物科技系生化與生醫工程碩士班 蘇文達所指導 張瑀洛的 中藥懷牛膝提取物預防IL-1β刺激的軟骨細胞發炎反應之發生 （2021），提出因為有 骨關節炎、懷牛膝、發炎、白介素-1β、SW1353人類軟骨細胞的重點而找出了 亞硝酸鈉sds的解答。
蟻巢傘菌漆氧化酶基因在嗜甲醇酵母系統中的表達
為了解決亞硝酸鈉sds 的問題，作者林怡萱 這樣論述：
蟻巢傘菌(Termitomyces)，又稱為雞肉絲菇 ，起源於非洲，分布於亞熱帶地區，屬於擔子菌類中的一屬，是一種白蟻共生真菌，可以產生分解木質纖維素(Lignocellulose)之酵素：漆氧化酶(Laccase)，最早被發現於日本漆樹，主要為分解共生白蟻食物中的木質素，為一種含有銅離子的多酚氧化酶(polyphenol oxidase , PPO)，可以氧化多種有機化合物。它存在於真菌、植物，或一些細菌之中，能夠分解木質素。本實驗利用與黑翅土白蟻共生的蟻巢傘菌之子實體，經實驗室前人基因選殖獲得漆氧化酶 cDNA 序列，再依據嗜甲醇酵母密碼子使用偏好，設計重組漆氧化酶，委託生技公司合成基因
，將重組漆氧化酶pCYL1004與pCYL2878轉型至 DH5α，純化質體與限制酶切割後選殖目標基因進入 pPICZαA 載體中，經培養與篩選後，將質體線性化，轉型到嗜甲醇酵母菌株，以甲醇誘導表現，獲得具有功能性的重組漆氧化酶，實驗結果顯示: 在BMMY培養基培養pPICZ-CYL2878(X-33)，使用0.5 %甲醇誘導、添加0.4 mM硫酸銅培養10天，粗萃取液活性為50.05 ~ 51.77 U/L；純化後活性為406.15 U/L，約增加為7.84 ~ 8.1倍，比活性為6.9227 U/mg；Native-PAGE膠圖在受質ABTS下有活性呈色； SDS-PAGE CBR染色與硝
酸銀染色膠圖結果顯示，蛋白質大小約70 kDa；酵素動力學分析以2,2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS) 為受質，使用分光光度計測量反應得到Vmax = 0.0166 mM/min、Km = 0.9250 mM、 kcat = 19.8 sec-1；使用光學溶氧度計測量反應得到Vmax = 0.0015 mM/min、Km = 28.7659 mM、 kcat = 1.7899 sec-1。
中藥懷牛膝提取物預防IL-1β刺激的軟骨細胞發炎反應之發生
為了解決亞硝酸鈉sds 的問題，作者張瑀洛 這樣論述：
骨關節炎 (Osteoarthritis，OA) 是最常見的關節疾病，主要病徵是關節軟骨的喪失和骨贅的形成，造成慢性疼痛和功能受限。目前臨床沒有藥物能根治。懷牛膝 (Achyranthes bidentata) 在傳統中藥學中被用來補肝腎、強筋骨和治療骨節疼痛等。因此本研究以懷牛膝作為研究對象，透過微波萃取設備提取懷牛膝中活性成分，測試其對IL-1β誘導SW1353人類軟骨細胞的發炎保護作用，並探討其保護途徑。實驗首先以反應曲面法找到80%乙醇萃取懷牛膝獲得最大皂苷量的微波萃取參數為固液比1：10、萃取時間20分鐘、功率721 W以及溫度65 °C。預估可得皂苷量為200.601 μ
g，實得皂苷量為194.01±9.46 μg，兩者間只有約3.3%差異。將SW1353以濃度50、100 μg/mL的懷牛膝萃取物(ABE)進行前處理，再以IL-1β刺激發炎。根據細胞實驗結果顯示ABE抑制NF-κB的活性，且顯著降低促炎因子IL-6、 TNF-α、COX-2、iNOS、PGE2和NO的表達，減緩發炎反應。並抑制MMP13和ADAMTS-5的表達，減少IL-1β誘導的軟骨外基質降解。此外ABE還降低IL-1β刺激造成的細胞凋亡蛋白Bax與Caspase 3蛋白表達。本實驗結果證明ABE對IL-1β刺激的SW1353軟骨細胞具有保護作用，能減緩發炎反應與細胞凋亡的發生，有潛力被開
發作為預防OA的新藥物。