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伽瑪-氨基丁酸乙型接受器調控藍斑核強直性抑制實驗及在大鼠睡醒調控中所扮演的角色

為了解決生理緩衝液生理食鹽水差別的問題，作者朱韻琳 這樣論述：

藍斑核(Locus Coeruleus)大部分是由去甲腎上腺素神經元(noradrenergic neurons)所組成，是主要提供正腎上腺素(norepinephrine)至前腦(forebrain)的腦區，它調控了許多生理行為作用如焦慮、記憶、學習及清醒等等。之前我們實驗室的鼠腦片(brain slice)電生理的研究顯示，伽瑪-氨基丁酸乙型接受器(γ-Aminobutyric acid B receptors，GABAB receptors)是只要主要調控藍斑核的強直性抑制(tonic inhibition)的神經傳導物質接受器，並且可以藉由調控環境中的伽瑪-氨基丁酸可以調控藍斑核的神

經放電速率(firing rate)。在本實驗中，我們測試了伽瑪-氨基丁酸乙型接受器是否也能夠在生物體的藍斑核中擁有調控其強直性抑制及神經放電速率的功能。 首先，在測試實驗中，我們先以伽瑪-氨基丁酸乙型接受器促效劑(agonist)經由外管直接注入至活動大鼠(Sprague-Dawley Rats)的藍斑核，在不同天的同一時間測試其睡眠以及清醒的時間比例差別，結果發現在藥物給予後的大鼠其睡眠時間有顯著性的增加(P=0.020526，N=4)。故我們推斷伽瑪-氨基丁酸對於藍斑核的抑制作用確實會影響生物體的睡醒比例。為了確定是伽瑪-氨基丁酸乙型接受器的作用造成此結果，我們將外管植入至藍斑核，在由

異氟烷(isoflurane)氣體麻醉的誘導全身麻醉(general anesthesia)之下，將實驗老鼠四腳朝天以翻正反射(return of righting reflex)以及腦電波(Electroencephalography，EEG)來判定其由麻醉轉至清醒所需的時間。我們的結果顯示，在異氟烷停止給予後，經由內管對藍斑核的直接局部灌注伽瑪-氨基丁酸乙型接受器拮抗劑(antagonist)藥物CGP35348能夠降低結束麻醉至翻正反射的時間(845.89±98.73 seconds，N=9)，其數據顯著低於控制組(灌注人工腦脊髓液)(N=9)，以及沒有注射至藍斑核的組別(N=10)。但

是在局部灌注下，無法確定該行為上的改變是由於藍斑核或是其他鄰近藍斑核區域例如中腦三叉感覺核區(mesencephalic trigeminal nucleus neurons，Me5)等受到藥物影響而產生，故我們使用能夠同時記錄單一神經元神經放電速率以及注射藥物的電極，記錄在聚氨脂(urethane)或三氯乙醛(Chloral hydrate)麻醉下的老鼠其在緩慢注射伽瑪-氨基丁酸乙型接受器拮抗劑藥物CGP35348之前後藍斑核神經元神經放電速率的變化。此實驗數據顯示，藍斑核神經放電速率在藥物注射前300秒之神經放電速率為2.9158±0.9422Hz，在藥物注射後300秒則為9.8599±2

.5460Hz，其神經放電速率在藥物注射後明顯高於注射前(P=0.01497，N=6)，而在其他型態染色上非位於藍斑核之神經元放電速率紀錄統計，其神經放電速率在藥物注射前以及注射後並無顯著差異(N=29)。且在藍斑核位置注射控制組磷酸根緩衝液生理食鹽水(phosphate buffer saline，PBS)之前後也並無顯著變化(N=6)。綜合上述實驗，我們的結果證實伽瑪-氨基丁酸乙型接受器對藍斑核的強直性抑制的確會對於生物體的睡醒調控有一定影響。