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以高效能分子篩層析法與酵素連結免疫分析法

為了解決10公升等於幾ml的問題,作者王詩婷 這樣論述:

單株抗體已普遍使用於研究植物細胞結構。本論文擬以酵素水解、陰離子樹脂層析、高效能分子篩層析法 (high performance size excluion chromatography, HPSEC) 與酵素連結免疫分析法 (enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 分析西洋參水溶性不可消化多醣之分子結構特徵。將去除蛋白質的西洋參粗多醣,以酵素水解除去澱粉,得到水溶性不可消化多醣,以陰離子交換樹脂層析系統,依流洗鹽濃度分離為F1、F2、F3、及F4四個區分。將各區分以HPSEC分析,搭配ELISA assay進行分子結構快速辨識與化學分析確認,使用

LM2、LM5、LM6、LM7、LM10、LM19、LM20與JIM7進行免疫親和反應。其中LM2及LM5被認為可代表arabinogalactan type II (AGII) 與 arabinogalactan type I (AGI) 結構。F1與F2多醣區分於鹽濃度為0–0.1M時出現,組成為arabinose與galactose,與LM5、LM6有親和反應,表示具有ß-(1→4)-galactan及linear arabinan分支。F3、F4多醣區分於鹽濃度為0.1–018M出現,具有酸性糖galacturonic acid與glucuronic acid,此二區分除了對於LM2、

LM5及LM6有親和反應外,以酸性糖為主要組成之F4對於LM19具有相當高的親和性,顯示此二區分具有partially methyl esterified HG以及RGI結構與AGI、AGII及linear arabinan等分支,此外四個區分對於LM10皆無親和反應,並不具有xylogalacturonan或xylan等結構。