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牙科黏著劑於聚氨酯泡棉之單體通透濃度及細胞毒性測試

為了解決3m泡棉膠去除的問題，作者梁庭珊 這樣論述：

牙科黏著劑廣泛運用於現今的牙科治療中，但臨床上仍常出現術後敏感、或牙髓神經發炎壞死的現象。追究其原因，包括未去除完全的受感染齒質、未聚合樹脂單體的細胞毒性、樹脂聚合過程中的收縮以及咬合干擾。牙科使用的單體是否會造成臨床組織壞死，各方論述不一；但多數研究認為：單體濃度決定對細胞的毒性影響程度。 目前有許多研究，為了測量透過牙本質釋放到牙髓腔的單體濃度，設計屏障實驗，但實驗結果往往受制於屏障材料的條件。因為目前的實驗多以人類或動物牙本質為屏障材料，其通透度會隨生物體本身的年齡、飲食習慣、齲齒等因素而改變，進而影響實驗結果。本實驗研究動機即在尋找一種可被認可的材料，以取代牙本質，做為標準化屏

障實驗材料。 目前已知樹脂單體對細胞的毒性影響取決於單體濃度，各種細胞對單體的毒性反應也有所不同，此次實驗即測試人類牙髓細胞及NIH-3T3細胞株的細胞毒性，比較兩者對樹脂單體的毒性反應。• 研究目的 本實驗目的在於比較牙本質與聚氨酯泡棉（Polyurethane foam, 40-pcf, PS, Sawbones®, Washington, DC, USA）的HEMA單體滲透濃度；以及HEMA濃度與Bis-GMA濃度對人類牙髓細胞和NIH-3T3細胞株的影響。• 研究方法一、 單體滲透測試：利用0.5mm及1.5mm厚度的牙本質以及Sawbones，在牙科黏著劑3M ES

PE Single Bond Universal Adhesive（SBU, 3M）、 ESPE AdperTM Single Bond 2（ASB, 3M）依廠商指示塗抹並聚合後，收集第1、4、8、12、24、48、72小時，共七個時間點的滲透液，並以高效能層析（HPLC）分析滲透液濃度。二、 在第一（短期）、四（中期）、七天（長期）共三個時間點，利用MTT assay、Alamar blue assay觀察兩種細胞的存活率；測量Caspase-3活性及LDH濃度，以觀察細胞死亡的狀況；利用免疫螢光染色，觀察短期細胞在測試液中的變化。• 研究結果一、 在0.5mm的試片厚度，且使用相同

牙科黏著劑時，牙本質與Sawbones的HEMA單體濃度無顯著差異。二、 細胞毒性測試顯示：細胞存活率與單體濃度有關；隨著單體濃度增加，細胞存活率則下降。三、 短期觀察顯示：在高濃度單體測試液中(HEMA 25mM, HEMA 25mM+Bis-GMA 2.5mM)，細胞會出現破裂情況；在低濃度單體測試液中(HEMA 1.25mM, HEMA 1.25mM+Bis-GMA 0.125mM)，細胞則展現高Caspase-3活性，代表早期凋亡的現象較控制組明顯。四、 免疫螢光染色顯示：細胞密度在24小時後會因為測試液中的單體濃度不同而改變；單體濃度越高，細胞密度越低。高濃度單體測試液(HEM

A 25mM, HEMA 25mM+Bis-GMA 2.5mM)中亦發現細胞破損情形。• 結論一、 Sawbones®為穩定、可預期的材料，可取代人類牙本質，用於屏障實驗。二、 相較之下，HDPC比NIH-3T3易受HEMA影響。三、 HPLC所得的HEMA濃度，對人類牙髓細胞和NIH-3T3細胞均有毒性影響。