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國立清華大學 化學系 林俊成所指導 李泗芃的 探討嗜熱菌 Meiothermus taiwanensis ATCC BAA-400 之半乳糖激酶酵素動力學及應用於合成 Pk 抗原類似物 （2011），提出992 GT3 RS關鍵因素是什麼，來自於半乳糖激酶、半乳糖轉移酶、Pk 抗原。

而第二篇論文國立臺灣大學 生化科學研究所 邱繼輝所指導 王穗華的 內皮細胞及B細胞多乳糖胺聚醣與雙唾液酸醣質體的有效鑑定 （2010），提出因為有 質譜儀、多乳糖胺聚醣、雙唾液酸、硫酸化的重點而找出了 992 GT3 RS的解答。

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接下來讓我們看這些論文和書籍都說些什麼吧：

除了992 GT3 RS，大家也想知道這些：

992 GT3 RS進入發燒排行的影片

[狂人日誌] Porsche World Roadshow 2019，賞你一個痛快！

#狂人：
悶熱的星期三，不安於室的你是否也跟我一樣，不想上班？
僅此獻上PWRS 2019的花絮快閃，沒有天花亂墜的對白，終究一台車僅此一圈的淺嚐恐怕放在心裡比較實在---你，準備好跟著全線預備的保時捷一起 Get your Wednesday groove on了嗎？

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P.S.：話說，上一回的PWRS可還舉辦在大鵬灣哪...已悲傷

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探討嗜熱菌 Meiothermus taiwanensis ATCC BAA-400 之半乳糖激酶酵素動力學及應用於合成 Pk 抗原類似物

為了解決992 GT3 RS的問題，作者李泗芃 這樣論述：

在本論文中，選殖、表達台灣本土嗜熱菌 Meiothermus taiwanensis ATCC BAA-400 的半乳糖激酶 （galactokinase，GalK） 並以 IMPACTTM-CN系統純化可得 16 mg/L 的半乳糖激酶重組蛋白。半乳糖激酶重組蛋白最佳化反應溫度為 75 oC、最佳化反應酸鹼值為 9.0。半乳糖激酶重組蛋白對半乳糖的kcat/Km 值為 168.47 s-1mM-1，於 55 oC 和 75 oC 分別測得的比活性為 240 U/mg 和 388 U/mg。半乳糖激酶與實驗室已有的葡萄糖-1-磷酸胸苷轉移酶 （glucose-1-phosphate

thymidylyltransferase，RmlA）結合，可進行一鍋化反應製備尿苷二磷酸半乳糖 （UDP-Gal）。 分別由 Neisseria meningitides 與 Haemophilus influenzae Rd KW20 選殖兩種來源不同的 α-1,4-半乳糖轉移酶。C-端截斷 （truncated） 19 個胺基酸的N. meningitides α-1,4-半乳糖轉移酶（LgtC-19）與N-端截斷 38 個胺基酸的 H. influenzae Rd KW20 α-1,4-半乳糖轉移酶（N-cut-38-Hi0258），皆可運用於階段式一鍋化反應合成 Pk 抗原類似

物 （α-D-Gal-(1-4)-β-D-Gal-(1-4)-β-D-Glc -OC6H12N3）。

內皮細胞及B細胞多乳糖胺聚醣與雙唾液酸醣質體的有效鑑定

為了解決992 GT3 RS的問題，作者王穗華 這樣論述：

以質譜為基礎的醣質體及醣蛋白質體大多著重在鑑定醣鏈末端乙酰基乳糖胺上的唾液酸及岩藻醣化，對於N型醣鏈上是否為直鏈或是帶有支鏈的多乳糖胺聚醣則較少著墨，且大多只是憑藉著質譜所得的數據來推算其存在和可能的組成為何，因此，本篇論文主要是利用人類內皮細胞、老鼠及人類的B淋巴球為樣品，鑑定並挑戰分析多乳糖胺聚醣的結構特徵及其末端的唾液酸化和硫酸化修飾。 首先，以人類內皮細胞：EA.hy926和HUVEC為起始原料，利用介質輔助雷射脫附法和電噴灑離子化方法在MS及MS/MS的階段來仔細地探討多乳糖胺聚醣結構，同時並搭配endo-β-galactosidase酵素及Smith降解反應來鑑定其

是否為分支醣鏈及長鏈延伸的起始位置。和HUVEC相比，EA.hy926細胞的N型醣鏈帶有較少的唾液酸化和岩藻醣化，但多乳糖胺聚醣的長度較長且具有分支醣鏈，其延伸點並不侷限在目前已被證實具有相當重要生物意義的甘露醣6號碳上。拓展至醣質體方面的研究上，則利用Lycopersicon esculentum凝集素分別在醣、醣蛋白及醣胜肽的階段做純化，較為專一的兩步驟純化方法讓我們得知了至少有40個以上的醣蛋白候補者可能帶有乳糖胺聚醣。 小鼠B細胞株—BCL1上N型醣鏈的修飾主要為核心岩藻醣化，末端α鏈結半乳糖及唾液酸(Neu5Gc)化，且為非分支的多乳糖胺聚醣；相反的是，其O型醣鏈主要為簡單的c

ore 1結構，帶有單唾液酸或雙唾液酸修飾。利用唾液酸酶、　endo-β-galactosidase、MS/MS及化學分析方法可知，雙唾液酸主要靠α2-8鏈結，並同時存在於具有多乳糖胺聚醣延伸或非延伸的N型醣鏈上。以螢光標記唾液酸並搭配高效液相層析儀顯示雙唾液酸結構的含量在N型醣鏈和O型醣鏈是相當的，且CD45為其攜帶者之ㄧ。透過小鼠α2,8-sialyltransferase VI(ST8sia VI)基因抑制實驗可知，此酵素同時參與N型醣鏈和O型醣鏈上雙唾液酸的生合成，且ST8Sia VI和雙唾液酸結構的表現量皆會隨著B細胞分化而增加。 有趣的是，儘管其生理功能目前還不是很清楚，BC

L1的N型醣鏈末端的單唾液酸、雙唾液酸化乙酰基乳糖胺，及N型醣鏈核心結構皆可被硫酸化修飾。另外，在人類活化的B淋巴球上也鑑定到了α2,6-sialyated 6-sulfo-LacNAc結構，單和α2-6唾液酸化乙酰基乳糖胺相比，其為目前已知CD22更好的配體，這些B細胞上多乳糖胺聚醣鏈附加修飾的鑑定，使得Galectin和Siglec對B細胞分化的調控可以更為複雜精緻。總而言之，質譜分析技術的發展和進步，對於我們詳細地鑑定多乳糖胺聚醣結構來講，為一個相當重要的基礎，有助於我們對醣生物學及其它生理功能更近一步的了解。

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