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鄰苯二甲酸酯類之微生物降解研究

為了解決J12FT的問題，作者熊耀筠 這樣論述：

目 錄目錄………………………………………………………………… I表目錄……………………………………………………………… III圖目錄……………………………………………………………… IV中文摘要…………………………………………………………… VI英文摘要……………………………………………………...…… VIII前言………………………………………………………………… 1研究目的…………………………………………………………… 16材料方法…………………………………………………………… 17壹、 土壤樣本……………………………………………….….. 17貳、 分離降解PAE

s的菌株………………………………….….17參、 環境分離株菌種鑑定………………………………………183.1 純菌染色體DNA的萃取……………………………183.2 DNA量與純度比較…………………………….……203.3 核酸膠體電泳分析……………………………………203.4 以PCR的方法增幅16S rRNA基因片段……………213.5 定序與比對……………………………………………223.6 類源關係分析( Phylogenetic analysis ) …………..…223.7 菌種保存………………………………………………22肆、 土壤分離株降解PAEs試驗…………

…………………..…234.1 溶劑空白試驗組………………………………………234.2 系統空白實驗組………………………………………234.3 PAEs儲存標準液………………………………..……234.4 PAEs檢量線製備…………………………………..…234.5 儀器與方法偵測極限檢查……………………………234.6 DEHP回收率測定……………………………….……244.7 PAEs的液相生物降解……………………………..…244.8 萃取PAEs方法………………………………..………244.9 PAEs之GC-FID分析條件 ………………………….

.254.10 以HPLC分析降解中間產物PA………………….…25伍、 鄰苯二甲酸雙氧化酶序列之引子設計………………….…265.1 引子設計………………………………………………265.2 以PCR的方法增幅phtA基因片段…………………295.3 phtA基因片段純化………………………………...…295.4 轉殖作用（Cloning）…………………………………295.5 定序與比對……………………………………………335.6 類源關係分析 ……………………………………33陸、 海水光合菌之富集、純化與降解PAEs測試………………346.1 樣本來源………………………

……………………..…346.2 用Winogradsky column富集實驗…………………..…346.3 第二階段富集實驗…………………………………..…346.4 利用含魚肉之無機鹽培養基富集實驗…………..……356.5. 純菌分離………………………………………….……356.6. 菌種保存…………………………………………….…366.7. 以培養液形式保存………………………………….…366.8 測試光合菌在液體中降解PAEs能力…………….…366.9 PAESs萃取步驟………………………………………386.10 中間代謝產物濃縮與萃取……………………………386.11 紫硫

菌降解菌群NGS分析………………………..…39結果……………………………………………………………..…… 40壹、土壤降解PAEs的菌株………………………………………401. 菌種篩選與鑑定………………………………..………402. 降解PAEs能力…………………………………………473. Microbacterium spp.降解PAEs能力比較…………..…504. JBY085 Microbacterium lacus降解PAEs能力……….515. ZPD和ZPD3 Gordonia hydrophobica降解PAEs能力...53貳、 鄰苯二甲酸雙氧化酶序列phtA

引子對增幅結果…………58參、 海洋光合菌RuA2降解PAEs………………………….……63討論……………………………………………………………….…..72文獻參考 ………………………………………………………….. 78附錄………………………………………………………………… 86表目錄表一: 鄰苯二甲酸酯類化合物之物理化學性質。…………………6表二：鄰苯二甲酸酯類非生物分解作用半衰期。………………..…9表三：本論文使用的引子序列資訊。……………………………..…21表四：PAEs降解分離株與已知菌種的相似度及採樣點。……..…44表五：分離株培養9天降解PAEs百分比。…………………

.……48圖目錄圖一：鄰苯二甲酸酯類化合物各種支鏈結構。………………….…2圖二：鄰苯二甲酸酯類在環境中流佈與分解機制。…………….…7圖三：鄰苯二甲酸酯類化合物初步降解過程。……………………11圖四：鄰苯二甲酸的厭氧和好氧降解途徑。………………………12圖五：鄰苯二甲酸酯類化合物的兩種不同代謝路徑。……………14圖六：引子F189、F589和R1084。………………………….……28圖七：光合菌分離與純化步驟。……………………………………36圖八：光合菌降解PAEs能力實驗組別設計。………………….…37圖九：降解PAEs菌株的培養與篩選。……………………………40圖十：PAEs降解菌株菌落

外觀。……………………………..…45圖十一：PAEs降解分離株之16S rDNA之類源關係。..…………46圖十二：分離株培養9天降解PAEs百分比。……………………49圖十三：Microbacterium spp.降解PAEs能力。……………………50圖十四：JBY085和G11 降解4種PAEs的結果。………………51圖十五：JBY085和G11降解PAEs中間代謝產物變化。…………52圖十六：ZPD和ZPD3菌株型態與在降解培養基內特徵。……...53圖十七：ZPD和ZPD3降解PAEs 4mix 50ppm的結果。……..….54圖十八：ZPD和其他已知菌株的降解能力比較。……………

..…55圖十九：ZPD降解PAEs以GC-FID分析中間產物。……………56圖二十：ZPD降解PAEs以HPLC分析中間產物。………………57圖二十一：退化引子對phtA F189/ R1084增幅結果。……………58圖二十二：JBY085 phtA F189/ R1084序列比對結果。……………59圖二十三：引子對phtA F189/ R1084之類緣關係分析……………60圖二十四：退化引子對phtA F587/ R1084增幅結果。……………61圖二十五：引子對phtA F587/ R1084之類緣關係分析。……………62圖二十六：紫硫菌RuA2之外型、外觀及培養方法。……………63圖二

十七：紫硫菌RuA2之16S rDNA類源關係樹。……………64圖二十八：RuA2在不同培養基中型態差異。………………………65圖二十九：RuA2進行DBP降解培養。………………………..…66圖三十：各處理RuA2進行100ppm的DBP降解培養。……………67圖三十一：各處理RuA2進行1000ppm的DBP降解培養，以HPLC分析水層可溶性中間代謝產物。……………………………………69圖三十二：以HPLC分析水層可溶性中間代謝產物。……………69圖三十三：各處理RuA2進行100ppm的DBP降解培養，第28天採樣點以GC-FID分析有機層中間代謝產物。………………………71圖三十四：J

12之phtA序列於NCBI BLAST比對結果。……………72圖三十五：LF提出的DEHP生化降解途徑。………………….…73圖三十六：ZPD在水溶液中生長情況。……………………………74圖三十七：Gordonia sp. strain QH-11與ZPD的phtA序列之類源關係。……………………………………………………………………75圖三十八：鄰苯二甲酸雙氧化酶序列引子對phtA F189、F587、 R1084的增幅結果定序後之類緣關係分析。………………………76圖三十九：RuA2降解DBP可能的路徑。…………………………77

磁性膨脹石墨複合材料製備與干擾紅外線/毫米波效能研究

為了解決J12FT的問題，作者藍志祥 這樣論述：

本研究利用火藥爆炸製備含磁性粉體的膨脹石墨(磁性膨脹石墨)，以赤磷燃燒所產生熱源，瞬間將可膨脹石墨膨化為膨脹石墨，並藉由磁性粒子來改質膨脹石墨形成磁性膨脹石墨，再混摻聚乙烯(PE)及矽橡膠(RTV-615)製成毫米波及紅外線單層複合吸收膠片(16×16 cm2)，利用紅外線熱像儀及向量網路分析儀採用自由空間(free space)反射波法及穿透波法，測量複合材料對紅外線及毫米波的干擾效能。另將磁性膨脹石墨置於煙箱中實施動態測試，利用紅外線熱像儀測試磁性膨脹石墨對紅外線的干擾效能，比較不同濃度之干擾差異性。研究內容探討磁性膨脹石墨結構、不同磁性粉體(羰基鐵粉、四氧化三鐵)及介質含量比例等反應條

件對磁性膨脹石墨之電磁特性影響。利用FTIR、XRD、SEM及VSM等儀器，探討材料結構特性及電磁特性，作為干擾紅外線及毫米波之匿蹤材料，結果發現磁性膨脹石墨複合材料有很好的紅外線及毫米波遮蔽效能，形成具有良好的光譜遮蔽性能、分散均勻的干擾煙幕，除可強化抗紅外線遮蔽效果並具有毫米波干擾效能，可作為干擾紅外線/毫米波的煙幕材料或吸收材料。