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干擾阿拉伯芥N-acetylglucosamine-1-P uridylyltransferase之基因表達， 降低蛋白質N-醣基化且誘發離層酸調控種子發芽及幼苗發育 對鹽逆境之敏感性

為了解決Mio 848的問題，作者陳雅惠 這樣論述：

鹽害是危害農業的主因之一。植物為了應付鹽逆境而演化調整代謝產物的配置或是改變植物賀爾蒙的生合成與訊號傳遞等策略。己醣胺生合成路徑 (HBP) 整合了葡萄糖、胺基酸、乙醯輔酶A、以及三磷酸尿核苷，以合成二磷酸尿核苷乙醯葡萄糖胺 (UDP-GlcNAc) 並提供GlcNAc醣分子作為蛋白質醣基化之原料。阿拉伯芥有兩個乙醯葡萄糖胺-1-磷酸尿甘醯轉移酵素 (GlcNAc1pUTs)，是GlcNA.UTs基因轉譯的產物，能催化HBP的最後一個步驟，但它們的生化及分子功能仍有待發掘。本研究中，我們在glcna.ut2剔除突變株中採用dsRNAi技術來降低GlcNA.UT1的基因表達，並稱此轉基因植物為

iU1。iU1在鹽逆境下的種子萌發和早期幼苗發育受到抑制，UDP-GlcNAc的生合成減少、蛋白質N-醣基化改變、且出現未折疊的蛋白質反應 (unfolded protein response)。由於延遲種子萌發和早期幼苗發育受阻皆可以通過外源性fluridone（一種離層酸生合成抑製劑）以及藉由導入離層酸生合成突變基因 aba2或nced3來挽救，因此iU1轉基因植物的鹽敏感性狀與離層酸生合成有關。轉錄組學分析進一步支持了離層酸生合成和信號傳遞對iU1鹽敏感性狀的重要性。總結來說，GlcNAc1pUT對UDP-GlcNAc生合成、蛋白質N-醣基化、以及離層酸調控的種子發芽和幼苗發育過程中對鹽

逆境的敏感性的調控至關重要。我們的實驗結果為連結HBP、蛋白質醣基化、植物荷爾蒙，與鹽逆境之間的關係提供了相關證據。

藉由植入前胚胎基因篩檢及胚胎縮時攝影監控來提升試管嬰兒之臨床結果

為了解決Mio 848的問題，作者李俊逸 這樣論述：

為使試管嬰兒療程成功率更為良善，近年來多種侵入式或非侵入式之胚胎篩選技術蓬勃發展，冀望以更先進之技術於移植前鑑別個別胚胎的懷孕能力。而最常見之試管嬰兒療程失敗因素多與胚胎非整倍體有關，特別是針對重複著床失敗或不明原因重複流產之不孕症患者，為鑑定胚胎之非整倍體細胞於胚胎中之比例，多種著床前基因篩檢平台因應而生，其中以全面性染色體篩選相關平台最具優勢，用以判定全染色體之異常狀態。另一方面，基於縮時攝影培養系統之發展與成熟，非侵入式之胚胎篩選技術已從傳統之靜態形態學評估衍伸至最新穎之形態動力學分析，而發育時間參數與臨床結果間之相關性研究陸續開發多種形態動力學胚胎篩選模型，用以預測胚胎之懷孕潛能。本

論文之目標乃探討利用全面性染色體篩選與縮時攝影胚胎觀察等相關技術進一步改善試管嬰兒療程成功率之可能性。據此，本論文以茂盛醫院之資料回溯性探討兩個研究主題，其一為探討全面性染色體篩選之微陣列晶片比較性基因體雜合分析是否可改善好發非整倍體胚胎患者之試管嬰兒療程活產率；其二為探討是否與單胚胎移植之臨床結果相關。本論文研究一結果顯示，以微陣列晶片比較性基因體雜合分析進行著床前基因篩檢後，相較於未處理組 (32.8%) 可顯著改善高齡婦女不孕症療程之活產率(54.1%) (P = 0.018)，且經篩檢之高齡 (54.1%)、重複著床失敗 (51.6%) 與重複性流產(55.9%) 患者之活產率均相近於

接受卵子捐贈之患者(57.1%)。研究二結果顯示，低度鑲嵌體胚胎之形態學或形態動力學特徵無異於整倍體胚胎，然而高度鑲嵌體胚胎則具明顯延遲之t5 (median 51.9 hpi, P = 0.034) 與t8 (median 58.6 hpi, P = 0.032) 並伴隨較長之CC3 (median 14.7 h, P = 0.012)，在形態學上，高度鑲嵌體胚胎具顯著較高之多核發生率 (P = 0.011)。非整倍體胚胎則是具延遲之tB (median 106.0 hpi, P = 0.039)，形態分析發現其優等囊胚形成比率顯著低於整倍體胚胎者 (42.6% versus 65.7%,

P < 0.001)。再者，利用形態動力學分析模組KIDScore D5將整倍體胚胎依據所預測之著床能力分成三個等級，其中C等級胚胎相較於A等級 (76.2%, 79.4%, 68.3%) 與B等級 (62.5%, 66.7%, 62.5%) 胚胎具顯著較低之臨床懷孕率、著床率與持續懷孕率 (25%, 25%, 10%)(P = 0.0171 to < 0.0001)。本論文證明利用全面性染色體篩選技術可顯著改善好發非整倍體胚胎患者之試管嬰兒療程活產率，特別是針對高齡之不孕症患者。隨著篩選技術之進步，高解析度次世代定序技術可更準確地分離低度鑲嵌體與整倍體胚胎。基於此篩選平台，整併縮時攝影培養系

統與形態動力學篩選模型後，可知不同染色體狀態之胚胎雖具相異的形態動力學特徵，仍無法確切地預測染色體狀態。再者，形態動力學模型可進一步篩選具高懷孕潛能之整倍體胚胎。