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超活用!iPad玩家秘笈

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嗜麥芽窄食單胞桿菌的SmeYZ和SbeAB輸出幫浦對於鐵恆定的貢獻

為了解決NAS 功能 PTT的問題，作者陳鈺 這樣論述：

目錄中文摘要 iAbstract ii目錄 iv圖目錄 vi表目錄 vii第一章 緒論 1第一節 研究背景 11.1.1 Stenotrophomonas maltophilia 11.1.2 輸出幫浦 (efflux pumps) 11.1.3 鐵恆定對細菌之重要性 21.1.4 細菌獲取鐵的機制 31.1.5 Siderophore介導之鐵獲取 (siderophore-mediated iron acquisition) 3第二節 研究目的 4第二章 材料與方法 5第一節 研究材料 52.1.1

菌株與質體 52.1.2 培養基 52.1.3 引子 52.1.4 實驗藥品 52.1.5 試劑與緩衝溶液 62.1.6 儀器設備 7第二節 實驗方法 82.2.1 菌株的培養與保存 82.2.2 聚合酶連鎖反應 (polymerase chain reaction；PCR) 82.2.3 洋菜膠體電泳 (agarose gel electrophoresis) 92.2.4 DNA製備 92.2.5 勝任細胞 (competent cell) 製備 112.2.6 轉型作用 (transformation) 112

.2.7 接合作用 (conjugation) 122.2.8 電感耦合等離子體質譜 (inductively coupled plasma-mass spectrometry；ICP-MS) 122.2.9 細胞存活試驗 (cell viability assay) 132.2.10 泳動能力試驗 (swimming assay) 132.2.11 CAS (chrome azurol S) assay 132.2.12 鐵源支持生長試驗 (iron source supporting growth assay) 142.2.13 即時定量聚合酶連鎖反應

(quantitative real-time PCR；qRT-PCR) 152.2.14 C23O (catechol 2,3-dioxygenease) 活性測定 152.2.15 構築質體pEXΔSmeYZ、pEXΔEnt和pRKEntSxylE 162.2.16 KJΔEntΔYZ、KJΔSbeABΔYZ、KJΔSmeDEFΔYZ、KJΔFurΔEnt和KJΔFurΔYZ突變株之獲得與確認 16第三章 研究結果 18第一節 SmeYZ缺失導致細胞內鐵濃度下降 18第二節 SmeYZ缺失使stenobactin合成增加導致細菌生理功能受損 19第

三節 SmeYZ缺失導致stenobactin輸出減少 20第四節 SmeYZ缺失使sbeAB補償性的表現上升導致細胞內鐵濃度下降 21第五節 SmeYZ缺失使stenobactin合成增加導致sbeAB補償性的表現上升 22第六節 SmeYZ缺失可能使代謝衍生物累積導致stenobactin合成增加 23第四章 討論 24圖表 27參考文獻 39附錄 44