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石蓮花對缺血壓力下血腦障壁保護機制的探討：β-catenin的參與

為了解決Vivo X50的問題，作者盧俐羽 這樣論述：

缺血性中風是一種神經退化疾病，除腦細胞明顯受損之外，亦會造成血腦障壁 （Blood-brain barrier；BBB）的破壞造成通透性的提升，加劇缺血腦組織之發炎受損程度。近年來實驗室在動物及細胞實驗中均證實石蓮花水萃物（Water extract of Graptopetalum paraguayense；WGP）對缺血大鼠腦組織及不同腦細胞均有保護效益。但WGP對缺血壓力下受損的BBB是否具有保護效益，及參與其中的保護機轉尚有待釐清。已知β-catenin除了是血管內皮細胞壁處重要結構蛋白外，若入核亦可做為副轉錄因子和T細胞轉錄因子（TCF）結合調控基因表現。本論文因此首次評估WGP及

其主成分沒食子酸（Gallic acid；GA）是否透過 β-catenin保護缺血壓力下BBB的細胞結構及屏障性。本論文的研究重點有三項1）評估體外缺血（glucose-oxygen-serum deprivation；GOSD）對BBB細胞成員之存活及BBB模組通透性之傷害；2）評估WGP或GA是否具有保護GOSD環境下BBB結構及功能之功效；3）釐清WGP或GA是否可透過提升β-catenin，來保護GOSD環境下星芒狀細胞和內皮細胞之存活，並調控細胞中血管調控因子（Ang-1或VEGF）之蛋白表現，進而保護BBB之屏障性。實驗中主要利用體外缺血模式（GOSD），大腦內皮細胞/第

四型膠原蛋白/星芒狀細胞組成之體外BBB細胞模組做為研究平台，並使用化學抑制劑DAQZ （β-catenin抑制劑）來評估β-catenin是否參與WGP或GA對BBB之調控。使用分析方法包括台盼藍染色、細胞免疫螢光染色、西方墨點法、細胞貼附分析等方法。研究結果顯示GOSD處理明顯提升體外BBB細胞模組之通透性，但抑制星芒狀細胞與大腦內皮細胞的存活和β-catenin的總蛋白含量，同時亦促使β-catenin自細胞膜內往核內移動，顯示GOSD可能利用β-catenin入核去調控星芒狀細胞和內皮細胞的基因表現。低劑量之WGP及GA（0.1μM）均可透過提升β-catenin蛋白量來抑制被GOSD

提升的BBB通透性，亦可有效提升GOSD壓力下星芒狀細胞及大腦內皮的存活，及星芒狀細胞和內皮細胞的貼附性。因WGP或GA增加的β-catenin可以磷酸化（活化）ERK1/2或AKT來保護GOSD星芒狀細胞及大腦內皮細胞之存活。WGP亦可透過β-catenin提升大腦內皮細胞中Ang-1但抑制VEGF之蛋白表現，而GA則可透過β-catenin提升星芒狀細胞中Ang-1之蛋白表現，共同提升BBB屏障功能。另外WGP亦可抑制GOSD星芒狀細胞中VEGF之表現來保護BBB但不經β-catenin的媒介。整體而言本研究首次證實WGP及GA具有保護BBB的功效；WGP和GA可以透過對β-catenin

蛋白量的提升，保護BBB細胞成員的存活（經由活化ERK及AKT），及血管壁之穩定性（Ang-1表現之提升、VEGF表現之下降）。另外WGP及GA亦可促進星芒狀細胞及內皮細胞的貼附作用，但是否和 β-catenin有關尚有待釐清。經由上述研究成果更進一步提升我們對WGP抗中風機轉的了解，及未來WGP在治療腦中風之臨床價值。