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輔仁大學 生命科學系碩士班 李嘉雯所指導 陳建云的 JA誘導水稻PR基因啟動子之功能性分析 （2021），提出WD40 全 聯關鍵因素是什麼，來自於植物逆境、水稻、啟動子、逆境激素、甲基茉莉酸、分泌性訊息胜肽。
而第二篇論文國立成功大學 分子醫學研究所 蔣輯武所指導 陳詩旻的 探討磷酸水解酶PP2A的B56γ3調節次單元調控AKT/p70S6K致癌訊息路徑 （2019），提出因為有 蛋白磷酸水解酶2A型、B56γ3調節次單元、AKT/70S6K訊息路徑、大腸癌的重點而找出了 WD40 全 聯的解答。
WD40 全 聯進入發燒排行的影片
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jurassic world the game 第58集
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JA誘導水稻PR基因啟動子之功能性分析
為了解決WD40 全 聯 的問題，作者陳建云 這樣論述：
植物為了克服多種環境逆境，會引發各種的訊息調控，以增加抗性或適應性。先前的研究於水稻懸浮培養液中鑑定出分子量為34 kDa之蛋白質 (PR-8)，且屬第三型幾丁質酶，並以各種逆境反應相關激素處理後發現，PR-8基因能受到甲基茉莉酸（MeJA）的誘導而表現。本研究進一步驗證PR-8基因在水稻幼苗全株皆會受MeJA之調控而有增加表現量。為了確認PR-8啟動子與JA訊息傳遞之調控活性區段，先以基因資料庫分析PR-8啟動子序列，發現有數個MYB、MYC、ERF和WRRY等逆境調控相關轉錄因子之結合域，依其分布初步將PR-8啟動子序列以5’端序列遞減方式設計四片段PR-8p.D0、D1、D2及D3構築
於啟動子表現載體，以用於菸草暫時性表現系統中分析啟動子活性，GUS活性分析後，經MeJA處理後PR-8p.D2和PR-8p.D3之啟動子活性均顯著提升，為進一步確認PR-8啟動子受JA訊息影響之關鍵活化位，接續設計以3’端序列遞減方式將啟動子序列3’端TATA box和5’UTR去除後加上35S minimal promoter，分別建構PR-8p.D1W、3’D1、D2W及D3W啟動子表現載體，GUS活性分析顯示，此四組3’端序列遞減的合成啟動子之基礎活性皆比PR-8全長啟動子者提高2~3倍，然而經MeJA處理後，活性則無明顯變化。此外，為回歸探討此水稻基因啟動子在水稻系統的基因調控特性，以
比較其與菸草模式中是否相同，本研究亦使用水稻懸浮細胞作為啟動子暫時性表現分析平台，5’端序列遞減之啟動子活性分析結果顯示，PR-8p.D0和PR-8p.D1受MeJA誘導，與其在菸草模式中的表現趨勢不同；而3’端序列遞減之啟動子分析結果顯示，PR-8p.D1W、D2W及D3W經MeJA處理後，均有GUS藍色產物，以上結果推測其啟動子D2至TATA box前的386 bp片段內含有JA訊息調控域。由於PR-8是一外泌性蛋白質，為了進一步探討其分泌訊息胜肽（Osss）在水稻細胞分泌性蛋白質表現系統之應用性，於菸草模式中觀察PR-8啟動子驅動表現Osss::GFP-GUS融合蛋白質，結果顯示GUS染
色藍色產物大量呈現在維管束，故推測GFP-GUS融合蛋白外泌至質外體後，累積於維管束周邊。綜合上述結果，PR-8啟動子D2-TATA間有1個MYB、2個ERF、2個MYC及2個WRKY反應之cis-elements，這些轉錄因子結合域可能與JA訊息傳遞有相關，且其基因中的5’UTR可能也影響啟動子的活性。未來可利用Osss分泌性及其啟動子誘導的特性，建立一具有應用性的水稻懸浮細胞分泌性外源蛋白質的表現系統。
探討磷酸水解酶PP2A的B56γ3調節次單元調控AKT/p70S6K致癌訊息路徑
為了解決WD40 全 聯 的問題，作者陳詩旻 這樣論述：
磷酸水解酶2A型（Protein phosphatase 2A簡稱PP2A）是主要的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶之一，含有B56γ3調節次單元的PP2A全酶（以下稱為PP2A-B56γ3）在腫瘤抑制中扮演著重要的角色。p70S6K是PI3K/AKT/mTOR訊息傳導路徑下游的重要訊息傳導分子，受到營養物質和生長因子信號所調控，並且在多種類型的癌症中均發現具有致癌性。然而，PP2A-B56γ3則對p70S6K的Thr389位點的去磷酸反應有關。在本篇研究中發現在幾種癌細胞中，過度表現B56γ3會提高AKT磷酸化程度，B56γ3表現量降低則AKT磷酸化也降低的情況。我們研究了腫瘤細胞的磷酸化AKT、磷酸
化p70S6K、IRS-1以及B56γ3表現量之間的相關性。在這些不同的結直腸癌細胞株當中，LS147T的B56γ3表達量明顯高於其他細胞株。B56γ3的表現量與Ser473位點的磷酸化相較於Thr308位點的磷酸化較有正相關性。此外，我們還進行免疫共沉澱（Co-IP）以證實在HeLa、HCT116和SW480等細胞中p70S6K與B56γ3之間的相互作用。為了研究B56γ3 與p70S6K間互相作用的調控，我們利用接種不同密度的細胞以模擬營養物質及生長因子之可用性，我們發現當以較高密度條件培養細胞時，B56γ3穩定降低表現對p70S6K的磷酸化有明顯上調，而細胞以低密度培養時，B56γ3過度
表達會明顯降低p70S6K的磷酸化。在Co-IP 實驗中顯示出一致的結果，當細胞在高密度的培養條件下B56γ3與p70S6K間的互動有減少的情形。共軛焦免疫螢光顯微鏡分析中發現，當細胞於高密度培養時，p70S6K與B56γ3的共定位（colocalization）減少。在細胞實驗當中我們發現B56γ3正向調控p70S6K蛋白表現量，與資料探勘（data mining）的結果一致，兩分子在各類癌症組織檢體的mRNA表現呈現正相關。與我們在大腸直腸癌細胞中的發現相同，免疫組織染色（immunohistochemistry）分析發現在臨床大腸直腸癌症病人檢體中的B56γ3與磷酸化AKT也有正向關聯性
。再者，B56γ3的表現量與大腸直腸癌以及其他癌症類型中較差的預後有關。綜合上述，與已知扮演腫瘤抑制的角色相反，PP2A的B56γ3調節次單元參與了正向調控AKT活性以及p70S6K表現，或許在癌症發展的過程中扮演致癌的角色。