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硒調節三陰性乳癌4T1細胞雄性激素受體、IGF-1R/EGFR 訊息途徑及增加抗癌功效

為了解決XG750的問題，作者王綉月 這樣論述：

背景: 高劑量硒 (selenium, Se) 的抗癌能力與誘發氧化性凋亡有關，同時氧化壓力可以調節癌細胞的上皮生長因子/胰島素生長因子/雄性激素受體 (EGFR/IGFR/AR) 表現。因此，本論文乃探討Se是否可以抑制三陰性乳腺癌 (triple negative breast cancer, TNBC) 4T1 細胞的EGFR/IGFR/AR 與其下游的PI3K/Akt/mTOR、Ras/Raf/ERK 訊息途徑，進而降低4T1細胞的存活。材料與方法: 4T1細胞在對照組 (CNL組)、Se 500、Se 750、Se 1000、及Se 1500組，分別與0、500、750、1000、

1500 ng Se/ml 進行培養48小時。分析細胞內外Se含量、脂質過氧化產物 (malondialdehyde, MDA) 含量、粒線體活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 與分析粒線體膜電位的螢光染色觀察，以及硒蛋白家族 (selenoproteins, Sel) 蛋白表現及細胞免疫螢光染色；並進一步分析膜受體EGFR/IGFR/AR及受體相關的PI3K/Akt/mTOR、Ras/Raf/ERK 訊息途徑、腫瘤血管新生 (angiogenesis)、上皮轉間質化 (epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)、凋亡

(apoptosis)、癌症幹細胞 (cancer stem cell, CSC）及免疫檢查點 (immune checkpoint) 相關的蛋白質表現或mRNA量。結果: 細胞內Se及MDA的含量，均隨Se處理濃度的上升而明顯增加，同時Se 1500 組有最高的含量；硒蛋白包括SelP、SelW、SelH及GPx 的蛋白質表現，亦隨Se處理濃度的增加而顯著增加。相較於 CNL 組，Se 1500 組有最高的粒線體ROS螢光表現、最低的膜電位螢光表現，與最高的細胞核濃縮及裂解比例。Se 500、Se 750、Se 1000、Se 1500 組的EGFR/IGFR 及AR蛋白質表現及mRNA

含量均明顯低於 CNL 組，Se 1000及Se 1500 組有最大的抑制作用；膜受體相關的下游PI3K/Akt/mTOR 和 Ras/Raf/ERK 訊息分子的蛋白質表現，亦隨Se處理濃度的增加而顯著被抑制；此外，相較於CNL組，Se處理各組的血管新生相關標記HIF-1a/VEGF/MMP2/MMP9的蛋白質表現，均有顯著抑制作用，Se 1500組的表現最低；在EMT相關指標，Snail/Vimtein/N-cadherin的蛋白質表現隨Se處理濃度的增加顯著抑制，E-cadherin表現則顯著增加；與CNL組相比，Se處理對CSC (CD24/CD44) 的蛋白質表現，呈Se 劑量依賴性的

抑制；至於存活指標 Cyclin D1的蛋白表現，Se 1000及Se 1500組有最大的抑制效果；轉移指標 -catenin，其蛋白質表現情形為 CNL> Se500>Se 750>Se 1000>Se 1500 組；凋亡相關指標的細胞質細胞色素C (Cyto C) 及磷酸化的B細胞淋巴瘤2 (B-cell lymphoma 2, Bcl2)，隨Se處理濃度的上升而顯著增加。另一方面，相較於CNL組，PD-1/PD-L1/CTLA-4蛋白質及mRNA 含量，隨Se處理濃度的增加而明顯降低，Se 1500 組有最大的抑制作用。結論: 隨著4T1 細胞攝入較多的 Se，其硒蛋白表現及氧化壓力明

顯增加，與膜受體EGFR/IGFR/AR及其下游PI3K/Akt/mTOR 和Ras/Raf/ERK訊息途徑之抑制有關，進一步抑制血管新生、轉移、CSC、及EMT 標記、與 PD-1/PD-L1/CTLA-4表現。