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高壓輔助蛋白酶水解發酵黃豆渣水解物對降膽固醇的影響

為了解決e-power hybrid的問題，作者林翊琪 這樣論述：

本研究目的為開發於高靜水壓 (High hydrostatic pressure, HHP) 下萃取發酵黃豆渣以生產苦味較低且含有降低膽固醇之活性胜肽的豆類產品。黃豆渣分別於 HHP 於 100 MPa (50℃) 和 0.1 MPa (50℃) 分別以 Peptidase R、Protin NY100、Alcalase 及 Protamax 水解 24 hr，其中以 Peptidase R (PR) 於 HHP 水解(HHP-PR) 24 hr 之可溶性蛋白、游離胺基酸及胜肽含量分別為 487.47、210.12 及 502.55 mg/g ，而其 HMG-CoA reductase 抑制

能力為 64.41%為最高。將 HHP-PR 於高壓 (100 MPa) 下分別水解 3、6 及 24 hr，其可溶性蛋白 (487.47 mg/g)、胜肽 (502.55 mg/g) 及游離胺基酸 (210.12 mg/g) 以 HHP-PR24 為最高，較 HHP-PR3 分別提升了 20.7、28.1 及 26.9%。進一步將 HHP-PR 分別於 50 和 100 MPa 下水解 24 hr，以 100 MPa 之 HMG-CoA reductase 抑制能力較高 (66.90%)，較 50 MPa (59.78%) 高出 10.6%。接著將黃豆渣添加混合乳酸菌 (Lactobacil

lus casei, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus bulgaricus, Bifidobacterium longum) 於 42℃ 下發酵 3 hr，使其 pH 降低至 6.29，乳酸菌含量為 5.92 × 106 CFU/mL。將黃豆渣發酵液添加商業酵素 Peptidase R 於 HHP (100 MPa, 50℃) 下水解 3、6、24 hr，而 HHP 水解 24 hr (HHP-FH-PR24) 之可溶性蛋白、游離胺基酸、胜肽含量分別為 255.48、132.97 及 33

7.23 mg/g，其 HMG-CoA reductase 抑制能力為 80.43%。將 HHP-FH-PR24 以腸胃道消化酵素 (Pepsin 和 Pancreatin) (HHP-FH-PR24PP) 水解後其胜肽含量為 308.23 mg/g，HMG-CoA reductase 抑制能力則為 64.41%。HHP-FH-PR24PP 經過 Sephadex G-25 膠體層析後劃分出 4 個波峰，其中以分子量 170-240 Da 的劃分物 D 具有最高之 HMG-CoA reductase 抑制能力為 68.33%，其胜肽含量為 0.27 mg/mL。進一步將劃分物 D 以 RP-H

PLC 進行純化分離，其中 D3 和 D4 之胜肽含量分別為 0.69 和 0.09 mg/mL，其中分別鑑定出 Gln-Arg (QR)、Thr-Gly-Arg (TGR) 及 Ser-Pro-Ala-Gly (SPAG)，其抑制 HMG-CoA reductase 能力之 IC50 值分別為 11.31、7.08 及 7.46 μM。HHP-FH-PR24 分別以 500 (High fat diet + 500 mg/kg body weight okara, HOL) 和 1000 mg/kg of body weight (High fat diet + 1000 mg/kg bod

y weight okara, HOH) 口服餵予 C57BL/6 小鼠，其體重增加量分別為 0.14 和 0.18 g/day，與高脂飲食控制組 (High fat diet, HFD) (0.26 g/day) 相比分別下降約 0.12 和 0.08 g/day。HOL 和 HOH 組血清中 TC 含量與 HFD 組相比分別下降約 4.4 和 2.6%；TG 含量則分別下降約 40.3 和 53.1%；HDL (High density lipoprotein, HDL) 含量則增加約 6.5 和 6.3%。而血清中動脈粥狀硬化指數 (Atherosclerosis index, AI)

則分別增加約 11.9 和 12.9%。肝臟中 TC 含量 HOL 和 HOH 組與 HFD 組相比約降低 22.7 和 27.0%；TG 含量則分別降低約 13.7 和 19.4%。肝臟中 HMG-CoA/mevalonate 之比值則分別增加約 10.4 和 37.3%，而 HMG-CoA/mevalonate 之比值與劑量具有劑量依賴性。糞便中 TC 含量與 HFD 組相比 HOL 和 HOH 組分別降低約 39.9 和 15.0%；TG 含量則分別增加 17.5 和 35.2%。綜上所述，顯示以 HHP-FH-PR24 餵予 C57BL/6 小鼠具有可以降低其體內膽固醇之效果。