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非接觸式量測於細胞膜量測通透性研究

為了解決ea888一代的問題，作者吳宗霖 這樣論述：

細胞膜對於水的通透性 (Cell-membrane permeability to water) 與細胞膜對於抗凍劑的通透性 (Cell-membrane permeability to cryoprotective agents) 是生物樣本進行最佳化冷凍保存 (Cryopreservation) 的關鍵資訊。此項研究開發了一種微渦流 (Mirco-vortex) 系統，利用微流體 (Microfluidics) 通道的擴展區域在低雷諾數下，被動形成的流體動力 (Hydrodynamic) 將感興趣的細胞捕獲並且維持在渦流中。被捕獲的細胞會保持懸浮狀態 (Suspension)，並隨著局部

渦流的流線移動，因此，細胞被捕獲在該系統中避免了物理接觸 (Physical contact) 的情況發生，進一步支持細胞膜通透性的理論中利用細胞體積的圖形計算球型體積時，將其假設為100% 球形並且求出細胞膜活性表面積。因此，透過高速攝影中的即時細胞辨識系統，細胞膜通透性可以通過影像可視化追蹤單顆細胞並且取得其二維圖形，透過架設瞬態的滲透性梯度 (Osmotic gradient) 在細胞內 (Intracellular) 與細胞外 (Extracellular) 環境，計算響應細胞體積變化。本研究以急性 T 細胞淋巴瘤細胞系 (Jurkat) 為模型，來檢查新採用的微渦流技術，結果表明其數

值略高於現有技術。我們的結果呈現高於使用基於物理接觸的細胞捕獲裝置，顯示基於非接觸式的量測顯著影響細胞膜通透性的活性表面積，提供一個提高對於細胞膜通透性量測準確性的新方法。

以情境式恐懼制約模式解析幼年記憶形成與遠程記憶提取機制

為了解決ea888一代的問題，作者蔡宗志 這樣論述：

自然遺忘是一種記憶修剪及簡化的方式，以利於長期記憶的儲存。研究記憶如何長期儲存，是一個相當熱門的研究主題 ，其中幼年健忘為一種自然遺忘的模式，為一種研究遠程記憶機制之重要平台。目前文獻上有數個假說用來解釋幼年情境式記憶在成年時無法被提取的原因，但仍未達共識。大腦中海馬迴在情境式記憶之學習中，扮演著關鍵角色。而後壓皮質則與遠程情境式記憶提取有關，與海馬迴有密不可分的相互連結。然而，海馬迴與後壓皮質網絡在幼年健忘及遠程記憶提取中的關聯性則尚未釐清。為了研究幼年的海馬迴在記憶學習時參與的分子機轉，我們首先確認幼年鼠 (出生後20日)相較於成鼠 (出生後60日)表現長期記憶缺陷於物件位置記憶與情境式

恐懼記憶之作業。同時，在低強度學習條件下，幼年鼠海馬迴CA1的神經興奮度低於成年鼠。藉由電生理，幼年鼠的Schaffer Collateral-CA1 突觸的基礎興奮性突觸傳導與早期長期增益現象皆顯著低於成年鼠。反之，幼年鼠則較容易去增益現象。在神經突觸蛋白質的表現量上，幼年鼠海馬迴CA1的NMDA受體的次體GluN2B、PKMζ和PP2B都顯著高於成年鼠。進一步，我們觀察到CaMKII之Thr286自體磷酸化位點、GluA1之Ser831磷酸化位點，以及PKMζ生合成都會在維持早期長期增益現象出現。在單一次高頻電刺激的條件下，幼年鼠都顯著低於成年鼠。再者，我們發現在幼年鼠給予藥物阻斷NMD

A受體的次體GluN2B或PP2B均能有效地改善早期長期增益現象及長期記憶的表現。在神經迴路的研究上，我們也發現海馬迴會投射至後壓皮質，並於遠程情境式記憶提取時提高神經活性在顆粒狀後壓皮質、非顆粒狀後壓皮質、基底外側杏仁核、齒狀迴、外側內嗅皮質與後鼻皮質。再者，透過活化幼年記憶的後壓皮質印痕細胞，可以維持記憶至兩週之久。這代表後壓皮質在遠程記憶有重要角色。為了研究神經迴路於後壓皮質分區在遠程記憶提取之角色，我們使用順向與逆向的病毒標定法。我們確認小鼠的顆粒狀後壓皮質的興奮性神經從第五層投射至海馬迴背側CA1與非顆粒狀後壓皮質的表層。我們發現化學與光遺傳學抑制顆粒狀後壓皮質至CA1路徑，而非透過

顆粒狀後壓皮質至非顆粒狀後壓皮質路徑，則有選擇性參與遠程記憶提取。藉由這一系列的研究，我們提供了早期長期增益效應維持發育不成熟與後壓皮質印痕細胞是與幼年健忘之發源有關性。我們也發現了一個顆粒狀後壓皮質參與遠程恐懼記憶透過至CA1之路徑。本研究，我們提出了一個幼年健忘模式可能是合適的動物模式去研究遺忘跟遠程記憶之機轉。