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東海大學 生物學系 范聖興所指導 楊青坡的 探討果蠅dhlp基因與細胞週期調控與果蠅眼睛發育的關係 (2003),提出fzr150二期關鍵因素是什麼,來自於細胞週期。

而第二篇論文國立臺灣大學 病理學研究所 許輝吉所指導 柳舒祥的 肝細胞癌第四號染色體與第十一號染色體長臂異常表現基因之研究:位於染色體4q33之annexinA10、染色體11q23之ApoA-V及11q12之CANP基因 (2003),提出因為有 第十一號染色體、第四號染色體、基因表現、肝癌的重點而找出了 fzr150二期的解答。

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探討果蠅dhlp基因與細胞週期調控與果蠅眼睛發育的關係

為了解決fzr150二期的問題,作者楊青坡 這樣論述:

HURP (hepatoma up-regulated protein)是一個細胞週期調節素,被發現大量表現於肝癌細胞與許多類型的癌細胞。利用NCBI資料庫搜尋比對的結果,我們發現果蠅中有一個基因Drosophila HURP-like protein (dhlp)可能是HURP的同源基因。利用序列比對發現Dhlp與HURP兩者氨基酸的相同性為22%、相似性為38%。雖然兩者氨基酸序列的相似度不高,但兩者蛋白質功能區域的組成則非常相似。兩個蛋白質都含有一個D box,一個 nuclear export signal (NES) motif,一個KEN box,一個nuclear locali

zation signal (NLS) motif和一個GKAP homology 1 (GH1)的功能區域。由這些結果我們認為Dhlp可能與HURP一樣都會參與細胞週期的調控。為了研究Dhlp在細胞週期調控所扮演的功能與其分子機制,我們利用果蠅眼睛作為實驗的模式系統。在果蠅眼睛發育的過程中,細胞分裂與分化會受到緊密的調控,若細胞週期的調控出現問題則可容易的在成體果蠅的眼睛被偵測到。我們利用基因轉殖果蠅進行實驗,分析果蠅三齡幼蟲眼盤對於降低或大量表現Dhlp基因所產生的影響。我們發現降低或增加Dhlp的表現會導致果蠅眼盤第二細胞分裂溝進行分裂細胞數目分別增加1.5倍與3倍。BrdU染色的結果也

顯示,分裂細胞數目增加的原因是因為有絲分裂的缺失所造成的,而非已分化的細胞再次進行細胞分裂。利用抗體標定染色體與紡錘體,我們發現在GMR>Flag-dhlp的果蠅眼盤位於第二細胞分裂溝的分裂細胞會停頓於細胞週期的中期。除此之外我們還發現錯位排列的紡錘體。經由免疫染色我們發現Dhlp會隨著細胞週期的進行改變表現的位置。綜合這些結果我們猜測Dhlp這個全新的基因會作用於細胞分裂的檢查點而調控細胞週期的進行。

肝細胞癌第四號染色體與第十一號染色體長臂異常表現基因之研究:位於染色體4q33之annexinA10、染色體11q23之ApoA-V及11q12之CANP基因

為了解決fzr150二期的問題,作者柳舒祥 這樣論述:

肝癌是台灣地區常見的惡性腫瘤。在本研究中我們利用mRNA 分示法來篩選在肝癌組織中異常表現的基因,希望能找出肝癌組織中發生變化的重要基因,其中有三個新穎或已發現但尚無論文發表的基因,值得進一步研究,其中有兩個在肝癌組織中經常是低度表現的基因:分別是位於第四號染色體長臂(4q33)的annexin A10 (ANXA10) (後來證實是ANXA10一新穎較短isoform,命名為ANXA10S,GenBank Accession No. AY626137) 與位在第十一號染色體長臂(11q23)的apolipoprotein A-V。另一個則是位於第十一號染色體長臂(11q12.2),而在肝癌

組織中經常是過表現的新穎基因,我們命名為cancer associated nucleoprotein (CANP)。在本研究中,我們以反轉錄聚合�@連鎖反應(RT-PCR)的方式,大量檢測在肝癌組織中這三個基因異常表現的狀況,並與臨床病理學上的特徵做關連性的分析,以了解此三者分別在肝癌中可能扮演的角色。此外,在新穎基因CANP 的選殖上,我們成功的將其全長cDNA選殖出,且將序列提交GenBank資料庫,Accession No.AY457926。我們也進一步嘗試發掘此蛋白之特性與功能。在我們的研究中發現ANXA10S 和apoA-V mRNA主要表現在成年人的肝臟組織中,尤其是apoA-V

其表現是肝臟專一性表達的,而CANP mRNA的表現則是較普遍性的表達在各種的胎兒及成人組織中,相較之下CANP mRNA在成年人的肝組織中的表現量是非常低的。在我們所分析的肝癌組織中ANXA10S 和apoA-V mRNA低度表現的比例分別是66% (121/182)和65.9% (190/288),而CANP mRNA則是在76% (214/283)的外科切除的單發性原發性肝癌組織中有過表現的狀況發生。在臨床病理學特徵的關連性分析方面,我們亦發現ANXA10S 和apoA-V低度表現的病患常伴隨發生高血中甲型胎兒蛋白的現象(分別為P