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Cellvibrio sp. (R107) 洋菜酶之基因選殖與生化性質及其水解產物生物活性評估

為了解決sds編號的問題，作者林昱甫 這樣論述：

本實驗室自高雄市鳳鼻頭漁港篩選到可分解洋菜之細菌，經16S rRNA比對發現與Cellvibrio sp. OA-2007相似度達99.45%，因此，暫時命名為Cellvibrio sp. (R107)。為了進行agarase基因選殖，由NCBI資料庫中將C. OA-2007全基因體序列進行分析，得到3個agarase基因序列，將序列與其他agarase進行多胺基酸序列比對，依比對分析結果設計Agarase R1、R2及R3的專一性引子，再以PCR方式分別將基因片段選殖出來，得到Agarase R2基因為1791 bp、Agarase R3基因為1431 bp (Agarase R1基因尚未

選殖成功)，將已知的Agarase R2、Agarase R3基因序列與C. OA-2007 agarase進行比對，相似度分別達96.48%及96.65%，推測為β-agarase。以粗酵素 (Agarase R Mix)進行生化特性分析，研究結果發現此粗酵素最適反應溫度為40℃、最適反應pH為6.0。Agarase R Mix可水解多種多醣，包括：HMP agarose、LMP agarose、agar、sodium alginate、soluble starch、κ-CA、ι-CA、λ-CA等基質，其中與HMP agarose具最高基質特異性。醱酵48小時之Agarase R Mix於醣

苷鍵特異性試驗中發現Agarase R Mix同時作用α-linkage及β-linkage。DTT、β-ME使Agarase R Mix之酵素活性提升；而urea、SDS及EDTA使酵素活性下降。經TLC分析，發現主要水解產物為新洋菜二醣、四醣及六醣。本研究將粗醱酵液以centrifugal filters分離純化可以得到不同分子量範圍之寡醣，將各區段寡醣進行其抗氧化活性及細胞活性評估。由抗氧化活性結果顯示，30-10 k寡醣於濃度5 mg/mL可清除47.58%之DPPH自由基、亞鐵離子螯合之IC50值為1.98 mg/mL 皆有最佳效果，且ABTS自由基之IC50值為2.63 mg/mL

僅次於10-3 k寡醣 (IC50 =2.55 mg/mL);由細胞實驗結果顯示，10-3 k寡醣對Caco-2有最高毒殺率，利用RT-PCR進一步分析Bax/Bcl-2、cytochrome-c、caspase-3凋亡基因，10-3 k寡醣於1 mg/mL濃度時之mRNA表現量與控制組相比皆提高1.2倍以上。綜合細胞實驗結果，10-3 k的寡醣可能會透過內部粒線體途徑誘導Caco-2細胞走向凋亡途徑。經Agarase R Mix降解的寡醣具抗氧化性及可誘導癌細胞凋亡之作用，期待可應用於保健食品的開發。

地板除蠟及打蠟作業之揮發性有機物排放特性研析

為了解決sds編號的問題，作者李易璇 這樣論述：

清潔作業是維持室內空間環境整潔明亮與舒適健康最常見的方式，然而清潔作業中所使用的清潔劑或多或少都含有揮發性有機物，是影響室內空氣品質常見的污染物之一。本研究嘗試以地板除蠟及打蠟作業為研究對象，針對不同的清潔劑配方比例與室內空間環境不同的條件下，進行實際的除蠟及打蠟作業操作過程，室內空氣揮發性有機物(volatile organic compounds, VOCs)濃度變化的監測，分析地板除蠟及打蠟作業過程中VOCs濃度特性，並研擬降低因地面清潔作業衍生室內空氣VOCs濃度之可行方案。研究結果顯示：當除蠟劑與水的配置比例為1:3，室內VOCs濃度由原本的背景濃度約0.257 mg/m3，逐漸上

升至最終濃度為1.496 mg/m3，淨增加了1.239 mg/m3的室內空氣VOCs濃度；當除蠟劑與水配置比例調整至1:2時，室內VOCs濃度則由背景濃度約0.433 mg/m3，最高增加至2.625 mg/m3，最終平衡濃度約為2.365 mg/m3，約淨增加了1.932 mg/m3室內空氣VOCs濃度；此外，於未開啟門窗、風扇、空調的密閉空間，進行地板除蠟及打蠟作業時，室內VOCs濃度，由背景濃度約0.257 mg/m3，在進行打蠟作業期間，VOCs濃度上升至最高1.476 mg/m3，淨增加值約為1.219 mg/m3，最終平衡濃度為1.493 mg/m3；而開始進行打蠟作業後，室內V

OCs濃度開始逐漸上升，濃度最大升幅為打蠟後的110分鐘。室內VOCs濃度最高至7.179 mg/m3，淨增加值約為5.686 mg/m3，並持續保持平衡濃度約為5.061 mg/m3，直到打蠟後24小時才降至1.535 mg/m3。本研究跟據實驗所得的結果，研擬相關可行方案，如建議採用較低污染物濃度的蠟劑，以及強化通風換氣等，藉以降低室內VOCs濃度。