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數種台灣產民間藥在脛骨骨髓細胞培養系中對成熟蝕骨細胞之影響 及細胞激素在其中所扮演的角色

為了解決yamaha sr500台灣的問題，作者侯淑真 這樣論述：

本研究主要針對台灣產民間藥對於ICR小鼠骨髓細胞系中成熟蝕骨細胞(osteoclast-likemultinucleated cells；MNCs)的影響，並藉由酵素連結免疫吸附分析法（enzyme-linkedimmunosorbent assay；ELISA）來了解這些台灣產民間藥對於蝕骨細胞分化成熟過程中的調控因子(IL-1? IL-6, TNF-? PGE2)有何影響。本研究所採用的台灣產民間藥分別為：冇骨消 (Sambucus formosana Nakai )；刺仔頭 (Acacia farnesiana (L.) Willd.)；細本山葡萄 (Vitis thunbergii

Sieb. & Zucc. var. adstricta (Hance) Gahnep)；肺形草 (Tripterospermum taiwanense (Masamune) Satake)及黃金桂(Cudraniacochinchinensis (Lour.) Kudo et Masam. var. gerontogea (Sieb. & Zucc.) Kudo etMasam.)。在體外研究模式中，以1a, 25-(OH)2D3誘發蝕骨細胞的生長，同時分別加入5µg/ml、50µg/ml、500 µg/ml三種濃度之上述藥物抽出物，培養七天後，以TRAP（tartrate-resistan

t acid phosphatase）染色法，觀察這些台灣產民間藥對於蝕骨細胞的生長是否具抑制性。結果發現，當藥物濃度為500 µg/ml時，加入冇骨消、刺仔頭、細本山葡萄、肺形草、黃金桂水抽出物、黃金桂酒精抽出物等組，均可明顯抑制成熟蝕骨細胞的生長；而在50µg/ml濃度時，除刺仔頭組不具顯著差異外，其餘均可明顯抑制成熟蝕骨細胞的生長。且發現50µg/ml濃度之藥物抽出物，對蝕骨細胞之抑制為可逆現象。接著以MTT偵測技術分析細胞的存活率，在成骨細胞方面，發現上述藥物抽出物對於成骨細胞不具毒性作用，反而在冇骨消（500µg/ml）、肺形草（5、50、500 µg/ml）、黃金桂（5

、50、500µg/ml）等加藥組中，發現成骨細胞具增生作用。在蝕骨細胞方面，濃度為50、500 µg/ml之上述五種藥物抽出物，均有明顯降低蝕骨細胞生長，但500 µg/ml的冇骨消、肺形草、黃金桂酒精抽出物組，對細胞具有毒性。雌激素在蝕骨細胞的分化及活化過程中，為一重要調控因子，近年來發現蝕骨細胞(osteoclast：OC)及成骨細胞（osteoblast：OB）均含有雌激素之接受器。因此以去除卵巢老鼠之骨髓細胞做體外培養，分別加入上述藥物抽出物及雌激素（17b-Estradiol），觀察對成熟蝕骨細胞的影響性。結果發現此五種藥物抽出物，可降低因雌激素缺乏所導致之蝕骨細胞活化作用，對其生

長具抑制作用。再來以17 b-Estradiol kit測得17 b-Estradiol的含量，在第四天偵測，發現50、500µg/ml濃度之各加藥組中，17 b-Estradiol量較控制組（1 a,25-(OH)2D3）明顯增高釵h。這說明了，此五種台灣民間藥抽出物，可能具有類似17 b-Estradiol結構之植物性雌激素。另一方面，和蝕骨作用有關的細胞激素（如：IL-1 a, IL-6, TNF- a, PGE2）已經被證實可促進成熟蝕骨細胞的形成，進而導致骨質流失。為了要了解這些台灣產民間藥是否會對這些細胞激素有所影響，我們以ELISA的方法，測骨髓細胞培養系中細胞懸浮液之IL-1

a, IL-6, TNF- a, PGE2濃度，觀察這些台灣產民間藥之所以能抑制蝕骨細胞生長，是否藉由降低蝕骨作用有關的細胞激素而達到抑制的作用。結果發現50µg/ml、500µg/ml濃度之五種台灣民間藥，可藉由降低IL-1 a, IL-6, TNF- a而達到成熟蝕骨細胞抑制的作用，然而本實驗中PGE2並無顯著差異。從上述結果推論，本研究所採用之五種台灣民間藥，可能藉由降低蝕骨作用相關的細胞激素（IL-1 a, IL-6, TNF- a），進而達到抑制成熟蝕骨細胞數。另外這些台灣民間藥可能含有一些植物性雌激素，經由這些植物性雌激素的作用，而達到抑制成熟蝕骨細胞數目。