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國防醫學院 生命科學研究所 張雯所指導 芮卡許的 痘苗病毒與宿主免疫之間的相互作用： 1.Vaccinia virus penetration factor (VPEF)/Fam21在 突細胞對抗白色念珠菌功能的重要性 2. 基於痘苗病毒的疫苗賦予保護性免疫敘利亞倉鼠中的 SARS-CoV-2 病毒。 （2021），提出zs-613b dcard關鍵因素是什麼，來自於Fam21、痘苗病毒、白色念珠菌、疫苗、SARS-CoV-2 病毒、敘利亞倉鼠。

而第二篇論文國立臺灣科技大學 應用科技研究所 高震宇、鄭智嘉所指導 Fasih Bintang Ilhami的 Multifunctional Adenine-functionalized Supramolecular Micelles-Selective Cell Internalization and Chemotherapy against Cancer Cells （2020），提出因為有 腺嘌呤、自組裝、多功能超分子微胞、氫鍵、藥物傳輸、選擇性內化、化學光動力療法、癌細胞的重點而找出了 zs-613b dcard的解答。

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痘苗病毒與宿主免疫之間的相互作用： 1.Vaccinia virus penetration factor (VPEF)/Fam21在 突細胞對抗白色念珠菌功能的重要性 2. 基於痘苗病毒的疫苗賦予保護性免疫敘利亞倉鼠中的 SARS-CoV-2 病毒。

為了解決zs-613b dcard的問題，作者芮卡許 這樣論述：

1. 牛痘苗病毒(Vacv)屬於痘病毒科，是一種大型DNA病毒，宿主範圍廣，可感染哺乳動物細胞。我們之前對 HeLa 細胞的研究表明，牛痘成熟病毒被內吞到宿主細胞之胞內體中。在運送過程中利用胞內體內之pH酸化，病毒膜與胞內體膜融合，以釋放病毒內核進入細胞質，完成感染步驟。FAM21是 Wiskott-Aldrich Syndrome Protein and SCAR Homology (WASH) 蛋白複合物的一個組成成分，可介導內體膜上的肌動蛋白聚合，以促進含有貨物的囊泡從內體中分離出來。為了研究 FAM21 的體內功能，我們在 C57BL/6 小黑鼠中產生 FAM21 之剔除小鼠，主要以

表現FAM21 之CD11c 樹突細胞群作為剔除對象。來自 FAM21 (KO) 小鼠的骨髓衍生樹突細胞 (BMDC) 其吞噬能力、抗原修飾作用以及T細胞活化功能降低，可見得 FAM21 在樹突細胞 (DC) 功能中具有關鍵作用。 FAM21 KO BMDC細胞形態及細胞極性(Polarity)均有改善，因而影響到細胞移動。利用RNA微矩列分析 WT 和 FAM21 KO BMDC確定了TLR2/Clec4e訊息傳導路徑在 FAM21 KO 中減少。最後我們利用白色念珠菌感染小鼠膜腹腔中表現 KO老鼠 (1)抵抗力下降，死亡率增加 (2) 體內TLR2/Clec4e活化程度下降 (3) 白色念

珠菌在腎臟生長量增高。總結以上實驗結果證明FAM21對樹突細胞調節TLR2/Clec4e路徑十分重要。2. 新冠病毒 (SARS-CoV-2) 屬於冠狀病毒的 β 家族且可引起COVID-19的疾病。 SARS-CoV-2 導致 10-15% 的感染者顯現嚴重呼吸系統病徵以及 2-3% 的 死亡率，因此迫切需要疫苗來預防感染和控制病毒傳播。儘管目前市場上已 有以 mRNA 及腺病毒為基礎而產生的疫苗，但是它們對“冷鏈”運輸的依賴性 使得全球疫苗接種成為一項艱鉅的任務。在此情況下，穩定而易於輸送的凍 乾疫苗應有某些優勢。因此，建立另外的疫苗平台對因應 SARS CoV-2 和 未來出現的突變株仍

然至關重要。 牛痘苗病毒 (VACV) 已被用於根除天花疾病，而且具有便宜及方便運送之優 點。近來更已開發出幾種針對人類具有更高安全性的減毒病毒株。我們建構 了兩種痘苗病毒株 MVA-S 和 v-NY-S來表達全長 SARS-CoV-2 棘狀蛋白質 。 MVA-S 在哺乳動物細胞中生長受限且較為安全，而 v-NY-S 具有複製能 力刺激先天免疫效果較佳。此兩種疫苗在C57BL/6 小鼠中均可誘導出大量的 中和抗體，並產生了偏向 TH1 抗病毒的免疫反應。最重要的是，用 MVA-S 和 v-NY-S 對黃金倉鼠中進行感染，已接種疫苗之實驗組倉鼠可被保護，免 於 SARS-CoV-2 感染。可見得

這兩種疫苗是未來發展 最佳選擇。最後， 疫苗接種產生之中和抗體，並具有交叉中和 SARS-CoV-2 Delta 變異株之能力。

Multifunctional Adenine-functionalized Supramolecular Micelles-Selective Cell Internalization and Chemotherapy against Cancer Cells

為了解決zs-613b dcard的問題，作者Fasih Bintang Ilhami 這樣論述：

現今有許多治療癌症的方法，化學療法是最常被選用的的療程。傳統的化療方法有許多缺點，例如: 藥物溶解性不佳，無法專一性針對癌細胞。這些缺點造成正常細胞的傷害，也嚴重影響治療的效用與效率。藥物傳輸系統可將欲傳遞物質專一性的帶入體內特定部位。在癌症藥物的傳輸方面，奈米科技的運用，使藥物以特殊的尺寸傳遞，且可因應需求做功能上的調整，因此受到相當多的討論。其中，反饋刺激的高分子材料 (Stimuli-responsive polymeric materials, SRPMs)，可在受到特定刺激時改變其結構，這樣隨外界刺激改變物理性質的特性，獲得廣泛的關注。超分子型高分子微胞(Supramolecula

r polymeric micelles) 因具有良好的氫鍵結構，可自組裝成具有特殊物理性質的材料，特殊性質如:可調整的親和性，高專一性，具可逆性。以氫鍵媒介組合而成的高分子，已被用於模仿細胞核內核醣核酸與去氧核醣核酸鹼基對的微結構，作為藥物傳遞系統的架構。在本研究中，具雙腺嘌呤端基的超分子型高分子，在經過多重氫鍵的交互作用後，可在水中或液態緩衝液中形成球狀微胞。具腺嘌呤官能基的超分子型高分子微胞 (Adenine-functionalized supramolecular polymers micelles, A-PPG micelles) 具有許多特殊的性質，例如:雙極性，可調整且可逆的感

溫性相變態，球形結構，微胞大小可調控。在藥物傳輸上，酸鹼值與溫度改變可調控藥物的性質與釋放。體外細胞毒性與流式細胞分析的結果顯示，載藥微胞可有效地在不傷害正常細胞的狀況下，降低癌細胞的存活率。再者，A-PPG微胞，可增加藥物在水溶液中遞送至腫瘤的效率。因此此種微胞，在建構有效的癌症化療方法上，值得期待。由於微胞結構中含有 核鹼基氫鍵，包埋的藥物長期在富含血清的培養基中仍保持穩定；而在微酸性環境下，能快速釋放藥物。更重要的是，在體外細胞毒性與流式細胞分析中，可清楚的觀察到載藥的A-PPG微胞，對於癌細胞有高度專一性，且可快速地被癌細胞胞吞，誘發癌細胞凋亡；然而，正常細胞並不會胞吞A-PPG微胞，

且不會影響其生長。上述結果在分別包埋兩種不同的抗癌藥物 (厚朴酚, Magnolol和阿黴素Doxorubicin) 的實驗中均可觀察到。驗證具腺嘌呤結構的A-PPG微胞可顯著提高癌細胞專一性胞吞作用與凋亡。此種特性可以增進化療的效用與安全性。在接續的研究中，為了讓使藥物釋放更精準，我們將5-氨基酮戊酸 (photosensitizer 5-aminolevulinic acid, 5-ALA) 結合進A-PPG微胞，使微胞具光化學治療(photo-chemotherapy) 的功能。在雷射照射下，5-胺基乙酰丙酸 (5-aminolevulinic acid,5-ALA) 可轉換為原紫質IX

(protoporphyrin IX, PpIX)，原紫質IX會誘導微胞產生的活性含氧物(oxygen species)，進而使阿黴素的大量釋放。在體外實驗中，同時包埋阿黴素和5-氨基酮戊酸A-PPG的微胞，在雷射照射下，與未照射對照組相比，對於癌細胞有較高的細胞毒性。因此A-PPG微胞作為奈米級媒介，在提升癌症化療的安全性和效益上，有極大的潛力。

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