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國立中興大學 食品暨應用生物科技學系所 毛正倫所指導 陳欣郁的 脈衝光照射之杏香菇對卵巢切除鼠之生理影響 (2013),提出R350 自售關鍵因素是什麼,來自於杏香菇、脈衝光、維生素 D2、停經後骨質疏鬆症、代謝體學。
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脈衝光照射之杏香菇對卵巢切除鼠之生理影響
為了解決R350 自售 的問題,作者陳欣郁 這樣論述:
骨質疏鬆症(osteoporosis)是重要的公 共衛生議題,在停經後女性(postmenopausal women)以及老年人中相當常見,人口高齡化將導致患病率在未來幾十年大幅增加;此外,全球約有 50%人口都有維生素 D 缺乏症,維生素 D 缺乏會影響骨骼健康且易罹患骨質疏鬆症。菇類富含麥角固醇(ergosterol),而脈衝光照射技術可以在短時間內,將菇中麥角固醇轉換為維生素 D2;菇經過照射後轉換之維生素 D2 可增加血清中 25-羥化維生素 D 2之濃度,具有生理利用活性。本研究以脈衝光照射法製備出高維生素 D2 含量之鮑魚菇類,並以卵巢切除小鼠作為體內試驗模式,評估脈衝光照射
菇對停經後骨質疏鬆症之影響;藉由微電腦斷層影像測定股骨之骨質參數,並與成骨和破骨細胞活性的指標,及以核磁共振測定之血清代謝物輪廓進行分析比較。脈衝光照射製備鮑魚菇類,試驗之鮑魚菇類包括:珊瑚菇、杏鮑菇、杏香菇、日本蠔菇及粉紅玫瑰菇,先篩選出能夠產生最多維生素 D2 含量之鮑魚菇類,再評估脈衝光照射之最佳距離和次數。五種鮑魚菇類中,杏香菇能夠轉換出最多維生素 D2 含量;最佳脈衝光照射條件為距離 5 cm 及照射 60次,能夠使杏香菇產生較多維生素 D2(65.4 μg/g DW)之含量,當照射距離過短(2.5 cm)或照射次數過多(120 次)反而會使菇中維生素 D2 含量降低且明亮度也下降。
將最佳製備條件之杏香菇粉末儲存在 4 和 25 °C 下 0、7、14、30 以及 60 天,發現其維生素 D2 含量隨著儲存天數增加而降低,於 4 和25 °C 下儲存 60 天後,維生素 D2 含量分別損失了 28.9 和 37.7%。本部分結果顯示,脈衝光照射技術能夠快速且有效率地增加鮑魚菇類中維生素 D2 之含量;因此,脈衝光照射後菇類可作為飲食上補充維生素 D2 之良好來源之一。將最佳脈衝光照射條件製備而得之杏香菇粉末,餵予卵巢切除小鼠,實驗組別分為七組,包括:sham(偽手術+未餵食任何菇及藥物樣品) OVX(卵巢切除術+未餵食任何樣品)、NPM(卵巢切除術+未照射脈衝光杏香菇)、
LPM(卵巢切除術+低維生素 D2 劑量之脈衝光照射杏香菇)、MPM(卵巢切除術+中維生素 D2 劑量之脈衝光照射杏香菇)、HPM(卵巢切除術+高維生素 D2 劑量之脈衝光照射杏香菇)以及 alendronate(卵巢切除術+骨鬆藥物阿崙磷酸鈉),處理 23 週後,犧牲小鼠並分析其血清和股骨。餵食脈衝光照射杏香菇對卵巢切除鼠生理和毒性影響;生理方面評估餵食期間體重變化、犧牲後臟器相對重量和股骨長度,毒性反應則觀察肝和腎組織之染色切片。結果顯示,經卵巢切除處理組別之體重皆高於 sham 組,且股骨長度也顯著長於 sham 組,可能是卵巢切除後導致雌激素分泌減少,造成體重增加及骨頭長度變長。小鼠組
織病理切片之評估,為將肝、腎組織之染色切片於 400 倍光學顯微鏡下觀察,結果未發現任何病變,代表食用脈衝光照射技術所製備之杏香菇應是安全無虞的。脈衝光照射杏香菇對停經後骨質疏鬆症之影響,以脈衝光照射杏香菇餵食卵巢切除小鼠,分析其股骨和血清之骨質相關參數指標的變化。股骨骨小樑相關參數之結果顯示,脈衝光照射杏香菇確實能夠減緩骨質流失;此外,未照射脈衝光杏香菇也能夠減緩骨質流失,可能是杏香菇本身即含有多酚和類黃酮等菌類二次代謝物,具有保護骨質之效果,但其減緩骨質流失的能力不如脈衝光照射之杏香菇好;因為脈衝光照射之杏香菇同時具備高維生素 D2及菌類二次代謝物,使得降低骨質流失之效果較佳。再將脈衝光照
射杏香菇和骨鬆藥物 alendronate 處理組之股骨指標進行比較,發現 alendronate 減緩骨質流失之能力比脈衝光杏香菇好,表示 alendronate 較能減緩骨中礦物質之流失。此外,血清中成骨和破骨細胞活性指標之結果發現,脈衝光照射杏香菇確實可以提高卵巢切除小鼠血清中成骨細胞活性指標-骨鈣素和第一型原膠原蛋白之碳端胜肽的含量,且隨著維生素 D2 劑量升高,具有劑量反應,還能夠降低血清中破骨細胞活性指標-第一型膠原蛋白之氮端胜肽和??二酚胺的含量;表示脈衝光照射杏香菇能夠提升骨形成作用、降低骨再吸收作用及減緩第一型膠原蛋白之降解,代表其減緩股骨中有機成分流失之效果較佳。根據股骨和
血清之骨質參數指標之結果證實,脈衝光照射杏香菇確實能夠減緩股骨的骨質流失。利用 1H NMR 測定脈衝光照射杏香菇和骨鬆藥物 alendronate 處理之卵巢切除小鼠的血清代謝物質譜,定性定量出代謝物種類和濃度,以評估代謝物變化與骨質疏鬆症之關係。結果顯示,杏香菇處理組和 alendronate 處理組之代謝物變化有不同趨勢,因此將分為兩部分進行探討。先以組成分分析比較未照射脈衝光杏香菇和脈衝光照射之杏香菇處理組的血清代謝物,可觀察到經脈衝光照射杏香菇組之血清代謝物確實不同於未照射脈衝光杏香菇處理組;進一步分析比較脈衝光照射杏香菇處理組和其它組別之間的血清代謝物濃度,可發現脈衝光照射杏香菇
處理組的血清中胺基酸和能量相關代謝物,皆高於 OVX 組,其中,精胺酸、離胺酸、牛磺酸、肌酸和乳酸等代謝物能夠促進骨質健康,大部分皆與促進第一型膠原蛋白之合成相關。再利用組成分分析和偏最小平方區別分析模式,分析 alendronate 處理組血清之代謝物,發現 alendronate 之代謝物輪廓表現與 sham 和 OVX 處理組不同,表示alendronate 處理後確實改變了卵巢切除小鼠血清代謝物之表現;進一步分析比較其血清代謝物濃度,可發現 alendronate 處理組之血清葡萄糖以及 3-羥基丁酸、乙醯乙酸和丙酮等酮含量皆顯著高於 OVX 組,因此,骨鬆藥物alen
dronate 可 能 與 影 響 血 糖 之 相 關 代 謝 作 用 有 關 。 而 比 較 杏 香 菇 與alendronate 處理組之血清代謝物結果,發現兩者血清中牛磺酸之含量皆高於OVX 組,並且都能夠減緩骨質流失,代表血清中牛磺酸濃度應可當作骨質疏鬆症診斷之重要指標。結論,脈衝光照射技術能夠快速地增加杏香菇中維生素 D2 之含量,且能夠減緩卵巢切除小鼠之骨質流失及提升血清中促進骨質健康代謝物之濃度。因此,脈衝光照射杏香菇可當作補充維生素 D 之良好來源,且具有減緩骨質疏鬆之能力。
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