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製備金奈米棒/二氧化鈦/介孔二氧化矽/上轉換複合奈米粒子應用於癌症治療
為了解決UV100 PTT 的問題,作者陳頌龍 這樣論述:
本研究以晶種成長法合成金奈米棒(gold nanorods; AuNRs),且利用三氯化鈦水解產生二氧化鈦奈米顆粒於金奈米棒(AuNRs-TiO2)之兩端,再透過TEOS作為矽源包覆在二氧化鈦修飾之金奈米棒(AuNRs-TiO2@mSiO2),進而形成中孔洞之二氧化矽殼層,利用所形成之孔洞搭載癌症標靶藥物MTX(AuNRs-TiO2@mS-MTX),最後以利用靜電吸附作用與鑭系元素摻雜之上轉換奈米粒子 (lanthanide-doped upconversion nanoparticles)組裝為奈米複合材料(AuNRs-TiO2@mS-MTX:UCNPs)。未經修飾前之金奈米棒,其短軸與長
軸之表面電漿共振峰於515 nm與630 nm 處,經修飾二氧化鈦奈米顆粒於金奈米棒兩端後,短軸與長軸之表面電漿共振峰於520 nm與660 nm 處匹配上轉換奈米顆粒所釋放之可見放光,進而驅動二氧化鈦修飾之金奈米棒產生熱能,進行光熱治療。同時熱電子會傳遞至奈米金棒兩端的二氧化鈦奈米顆粒進行光解催化反應進而產生活性氧物質,來破壞癌細胞,且本複合材料搭載了MTX,所以還具有化學療法的功效,綜合上述,此複合奈米顆粒是一光熱奈米顆粒,其具有三重治療(光熱治療/ 光動力治療/ 化學藥物治療),以及生醫CT造影之功能。以可見光/紫外光分光光譜儀 (ultraviolet/visible spectros
copy)與光激發光光譜儀(photoluminescence spectroscopy)檢測二氧化鈦修飾之金奈米棒之表面電漿共振波段與上轉換奈米粒子放光之匹配性。並透過升溫測試與 ROS 產量檢測證實複合材料具良好之光照療效。經生物性檢測分析,此奈米複合材料對口腔癌細胞具良好之生物相容性。然後以808nm 雷射照射後,該奈米複合材料可因上轉換奈米粒子之放光特性,轉換近紅外光光至可見光波段之發光,進而驅動二氧化鈦修飾金奈米棒進行光熱治療、基於光解催化的光動力治療以及搭載MTX的化學療法,並以此增效之光照治療對癌細胞產生顯著之毒殺效果。
開發功能化微脂體平台於癌症熱治療
為了解決UV100 PTT 的問題,作者Anilkumar T S 這樣論述:
Table of contentsCONTENTS PAGERecommendation letter from thesis advisor……………………..………Thesis/Dissertation oral defense committee certificate……………Acknowledgement iiiChinese abstract viEnglish abstract viiiT
able of contents xiList of figures xviiList of tables xxAbbreviations xxiChapter 1: Overview of Caner Thermal Therapies 11 Introduction 12 Background of thermal therapies 63 Objective 7Chapter 2: Applications of Magnetic Liposomes in Cancer Therapies 91 Introd
uction 91.1. MNPs and liposomes in cancer treatment 101.1.1. Significance of MNPs in cancer therapy 101.1.2. Significance of liposomes in cancer therapy 141.2. Preparation methods of MNPs, liposomes and magnetic liposomes 161.2.1. Preparation methods of MNPs 161.2.1.
1. Physical method 161.2.1.2. Biological method 171.2.1.3. Chemical method 171.2.2. Preparation methods of liposomes 181.2.2.1. Thin film hydration or Bangham method 191.2.2.2. Extrusion method 201.2.2.3. Reverse phase evaporation method 211.2.2.4. Superc
ritical reverse phase evaporation method 211.2.2.5. Detergent depletion method 221.2.2.6. Injection method 231.2.2.7. Microfluidic channel method 241.2.3. Preparation of magnetic liposomes (MLs) 252 Magnetic liposomes in cancer therapies 262.1. MLs for drug delive
ry and thermo-chemotherapy 262.2. MLs for gene delivery and combined gene therapies 312.2.1. MLs for gene delivery 322.2.2. MLs for combined gene therapies 332.3. MLs in photothermal/photodynamic therapy or magneto-phototherapy 342.3.1. Advantages of MLs for targeted ph
otothermal/photodynamic therapy …………………………………………………………………………362.3.2. Use of MLs in photothermal-AMF combined method (magneto-phototherapy) 372.4. Application of MNPs and MLs for cancer imaging and therapy 413 Conclusion 44Chapter 3: Optimization of the Preparation of Magnetic Li
posomes for the Combination Use of Magnetic Hyperthermia and Photothermia in Dual Magneto-Photothermal Cancer Therapy 471 Introduction 472 Materials and Methods 512.1. Materials 512.2. Synthesis of Citric Acid-Coated Iron Oxide Magnetic Nanoparticles (CMNPs) 522.3.
Preparation of Magnetic Liposomes (MLs) 522.4. Experimental Design 532.5. Charactrization of Physico-Chemical Properties 552.6. Heating Efficiency Induced by AMF and/or NIR Laser 562.7. Intracellular Uptake of MLs by Cancer Cells 572.8. In-vitro Biocompatibility of ML
s 592.9. In-vitro Cancer Cell Killing by AMF and/or NIR Laser 592.10. Flow Cytometry Analysis for Apoptosis/Necrosis 602.11. Statistical Analysis 613 Results and Discussion 613.1. Model Development and Optimization 613.2. Characterization of Physico-Chemical Prope
rties 683.3. Heating Efficiency Induced by AMF and/or NIR Laser 783.4. Intracellular Uptake of MLs 803.5. Thermally Induced Cancer Cell Killing In-vitro 824 Conclusion 86Chapter 4: Dual Targeted Magnetic Photosensitive Liposomes for Photothermal/Photodynamic Tumor Therapy
871 Introduction 872 Materials and Methods 902.1. Materials 902.2. Synthesis of citric-acid coated iron-oxide magnetic nanoparticles 912.3. Synthesis of HA-PEG 922.4. Preparation of liposomes 922.5. Determination of encapsulation efficiency of CMNPs and ICG
932.6. Characterization of HA-PEG-MPLs 942.7. Temperature elevation induced by NIR laser irradiation 952.8. In-vitro cell culture experiments 952.9. In-vivo antitumor efficacy 962.10. In-vivo IVIS imaging 982.11. Statistical Analyses 993 Results and Discuss
ion 993.1. Characterization of HA-PEG-MPLs 993.2. In-vitro photothermal effects of HA-PEG-MPLs 1053.3. In-vitro cytotoxicity of HA-PEG-MPLs 1063.4. In-vivo effects of HA-PEG-MPLs 1083.5. In-vivo antitumor and tumor targeting effects from IVIS imaging 1114 Conclusi
on 115Chapter 5: Concurrent Photothermal and Photodynamic Therapy of Intracranial Brain Tumor Xenografts with Convection Enhanced Delivery of Liposomal IR-780 1161 Introduction 1162 Materials and methods 1202.1. Materials 1202.2. Preparation of IR-780 loaded liposomes 1
202.3. Characteristic of IR-780 loaded liposomes (ILs) 1212.4. Photothermal and Photodynamic effects study 1222.5. In vitro cell culture experiments 1232.6. Tumor cell implantation in xenograft mice brain 1252.7. Convection enhanced delivery 1272.8. In vivo temperatu
re measurements during NIR irradiation 1282.9. In vivo anti-tumor efficacy 1292.10. MRI and PET/CT study 1292.11. Bio-distribution 1302.12. Histology studies of tumor tissue 1312.13. Statistical analysis 1323 Results and discussion 1323.1. Characterization o
f ILs 1323.2. In vitro photothermal and photodynamic study 1383.3. In vitro cells experiments 1453.4. In vivo biodistribution 1483.5. In vivo photothermal effects 1503.6. Anti-tumor efficiency 1523.7. MRI and PET-CT studies 1553.8. Immunohistochemical analys
is 1594 Conclusion 163Chapter 6: Conclusions and Outlooks 1641 Summary 1642 Future perspective 165REFERENCES 166List of figuresFigure 2.1 Schematic diagram of MNPs or MLs induced with AMF. 12Figure 2.2 Schematic representations of different kinds of surface modified lip
osomes. 15Figure 2.3 The drug release mechanism from TSMLs 28Figure 2.4 The hyperthermia modality in magneto-phototherapy with MLs induced by MHT with AMF treatment, laser treatment or dual MHT/laser treatments. 38Figure 3.1 The Pareto charts of EE and Size. 65Figure 3.2 Predicted v/s Ob
served value Plots. 66Figure 3.3 Response surface Contour 3D plots. 67Figure 3.4 Particle size and surface charge distribution from DLS and TEM images. 70Figure 3.5 Magnetic liposomes stability measurements with NTA. 72Figure 3.6 XRD, FTIR, SQUID and TGA analysis of CMNP and MLs. 75F
igure 3.7 In vitro heating efficiency of CMNPs and MLs as induced by magnetic hyperthermia (MH) and/or photothermia (PT). 76Figure 3.8 Particle uptake studies with U87 cancer cells. 82Figure 3.9 In-vitro cells biocompatibility and cytotoxicity measurements. 83Figure 3.10 Flowcytometry analy
sis of MLs with different treatments 85Figure 4.1 Schematic illustration of HA-PEG-MPLs for dual targeted photothermal or photodynamic cancer therapy. 90Figure 4.2 Liposomes size from DLS and Cryo-TEM 100Figure 4.3 Characterization of different samples by XRD and FTIR. 102Figure 4.5 The
ex vivo photothermal effects of different samples 105Figure 4.6. The in vitro cell cytotoxicity and live/dead cell assays. 107Figure 4.7 In vivo photothermal effects. 110Figure 4.8 Representative photographs of the tumor-bearing mice 110Figure 4.9 The tumor volume, body weight and surviv
al curve of different groups. 112Figure 4.10 H&E and immunohistochemical analysis in tumor site 112Figure 4.11 The in vivo bioluminescence and fluorescence imaging by IVIS 114Figure 5.1 CED infusion cannulas and their parts 126Figure 5.2 Demonstration mice receiving samples via CED metho
d 127Figure 5.3 schematic diagram of ILs and their characterization 133Figure 5.4 UV-visible and FTIR spectroscopy 134Figure 5.5 Photothermal stability of free IR-780 and ILs 135Figure 5.6 Stability of ILs in FBS measured from nanoparticle tracking analysis. 136Figure 5.7 In-vitro pho
tothermal changes with NIR laser irradiations 139Figure 5.8 Photothermal stability of ILs and Free IR-780 140Figure 5.9 ROS generation detected by UV-visible. 143Figure 5.10 Cell cytotoxicity measurements with MTT and from flow cytometry. 144Figure 5.11 Particle uptake studies with confo
cal laser scanning microscopy. 146Figure 5.12 The bio-distribution analysis of ILs via CED. 149Figure 5.13 in-vivo photothermal effects. 151Figure 5.14 The antitumor efficiency by IVIS, the body weight and survival. 153Figure 5.15 Magnetic resonance images and tumor volume 156Figure 5
.16 PET-CT molecular imaging analysis 158Figure 5.17 H&E and immunohistochemical staining 160Figure 5.18 H&E staining of different organs of mice of all three groups. 161List of tablesTable 2.1 Examples of preparation of magnetic liposomes 25Table 3.1 The central composite design showing
the independent variables and levels used in the experiments 54Table 3.2 Central composite design arrangement and observed responses. 62Table 3.3 Validation of the model with predicated experimental values 65Table 3.4 Size and zeta potentials values. 68Table 3.5 Specific absorption rate
s (SARs) of CMNPs and MLs at 0.6 mg/mL CMNP equivalent1. 73Table 3.6 Apoptotic and necrotic analysis form flow cytometry analysis. 79Table 4.1 Particle size and zeta potential of CMNPs, MPLs and HA-PEG-MPLs. 99Table 5.1 Size and zeta potential values of ILs 129Table 5.2 Survival times of
mice treated in different groups 155Table 5.3 The standardized uptake values (SUVmax) of Ga68-RGD and Ga68-FAPI 159Table 5.4 Hematological parameters and biochemistry analysis in different treatment groups. 162
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