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使用環狀烯烃共聚物開發脊形聚合物光波導感測器

為了解決訊可科技平台式UV 直 噴 機的問題，作者紀信荃 這樣論述：

摘要本研究之目的為開發新型生物感測平台，此新型感測平台除了可以節省成本外，亦可簡化製程。本實驗室所開發的免標記光纖式粒子電漿共振生物感測儀 (Fiber-optic particle plasmon resonance , FOPPR)，其具有高靈敏度、方便攜帶、操作簡單且能快速地進行檢測，已發展出許多疾病的檢測方法。本篇研究為開發新型感測平台，原本晶片是使用光纖傳導光訊號，但由於製作感測光纖處理步驟繁複，因此我們嘗試使用以環狀烯烴共聚物 (Cyclic Olefin Copolymer, COC) 高分子來取代光纖，用以製作脊形光波導粒子電漿共振平台 (Ridge waveguide pa

rticle plasmon resonance, RW-PPR)，COC 製作過程簡單且成本較低，同時具有優良的光學特性因此適合做為導光材料。製作好的脊形光波導晶片需要對 COC 進行官能化才能作後續的修飾，首先修飾金奈米粒子進行糖水折射率測試，可得到良好的線性關係 (R2 = 0.998)，以及折射率感測解析度 (Sensor resolution) 為 6.15*10-5 RIU。生化檢測則以 FONLISA 法檢測 DNA 濃度，將含有分析物和檢測探針的樣品引注入 COC 光波導晶片中，在 COC 表面形成夾心狀的捕獲探針-分析物-檢測探針複合物，偵測 1*10-13 ~ 1*10-9

g/mL共五個濃度的 DNA 標準品，亦有良好的線性關係 R2 = 0.984，則 最低偵測極限 (Limit of detection, LOD) = 3.61*10-14 g/mL，實驗結果顯示使用 COC 高分子製作的光波導晶片可以偵測生化樣品，且其具有良好的線性關係以及 LOD，成功驗證 RW-PPR 平台的可行性。關鍵字 : 光波導,脊形波導,感測平台,環狀烯烃共聚物

利用致病性副溶血弧菌基因pirA及pirB做為開發多工光纖式金奈米連接免疫吸附法檢測之模型

為了解決訊可科技平台式UV 直 噴 機的問題，作者潘子歡 這樣論述：

急性肝胰腺壞死綜合症(acute hepatopancreatic necrosis disease ; AHPND)，是一種蝦類的疾病，能使蝦類的大量死亡，造成其致病的病原體是質體中編碼了類似Photorhabdus insect-related (Pir) 二元毒性的基因—pirA及pirB的副溶血球弧菌(Vibrio parahaemolyticus ; VP)。近幾年，急性肝胰腺壞死綜合症的爆發已造成各國蝦類養殖業的重大損失，因此，若能發展快速且靈敏偵測該致病病原的方法，對於此病的監控及預防有很重大的意義。本研究目的是將多工的概念帶入本實驗室開發的光纖式奈米電漿生物感測儀 (FOPP

R)平台，期望在同一光纖晶片上能檢測兩個(或以上)分析物。因此，在本研究中，我們在本實驗室開發的光纖式奈米電漿生物感測儀(FOPPR)中利用光纖式奈米金連接吸附法 (FONLISA)結合多工概念來檢測致病性副溶血球弧菌的基因序列，pirA及pirB。本研究中，我們使用的金奈米粒子以及光纖核心層表面都使用羧甲基葡聚醣包覆作為抗非特異性吸附層，以此來降低非特異性吸附及偽陽性。我們開法了一種簡單的方法來合成羧甲基葡聚醣包覆金奈米粒子 (AuNP@CMD)，首先，將葡聚醣及氯乙酸鈉在低濃度NaOH混合加熱20小時，可得到羧甲基葡聚醣溶液，再將其加入沸騰的四氯金酸鹽水溶液中，即可得到有高穩定度及再現性的

羧甲基葡聚醣包覆金奈米粒子 (AuNP@CMD)，並且吸收波峰約為519~521 nm，半高寬在75±5 nm。在分別修飾能和pirA及pirB序列雜交的detection probes在分別的金奈米上，以及將能和pirA及pirB序列雜交的capture probes修飾在同一個光纖晶片上後，我們建立了pirA及pirB各自的檢量線，並利用模擬實驗的序列Conden26做基質添加檢測，以此來驗證此實驗的可行性。根據標準曲線計算，可得到pirA及pirB在此實驗檢測的LOD在相關係數R2大於0.99的線性條件下，分別為1.63E-14 M以及 1.86E-14 M。並且在基質添加檢測中，不論先

檢測哪個樣品，都可以得到不錯的回收率。