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LamininB1抑制ERK1/2及SGK1的活化進而抑制大白鼠空間記憶的形成

為了解決ampa全名的問題，作者劉文婷 這樣論述：

層黏蛋白 (laminin) 是基底膜內主要的糖蛋白，屬於細胞外基質。研究指出層黏蛋白在學習與記憶扮演重要角色，且內生性laminin β1表現於海馬迴神經，但是目前對於層黏蛋白在中樞神經的瞭解仍不是很清楚。因此，本實驗室利用水迷津學習實驗探討laminin β1對大白鼠空間學習與記憶的影響，實驗結果發現，經過學習試驗後的大白鼠，其海馬迴CA1區域的laminin β1 mRNA和蛋白質表現量明顯地減少，laminin β2的表現則不受到影響。為瞭解laminin β1在空間學習與記憶力程中扮演的角色及其下游的訊息傳遞路徑，我們轉染laminin β1 siRNA至海馬迴CA1區域會促進大白

鼠在水迷津空間學習與記憶的能力，由西方墨點法也觀察到抑制海馬迴中laminin β1的表現量會促進SGK Ser422及ERK1/2的磷酸化，但是AKT Ser473的磷酸化則無顯著差異。當轉染質體基因laminin β1至CA1區域，則會抑制大白鼠水迷津空間學習與記憶的能力，同時也抑制SGK Ser422及ERK1/2的磷酸化。由於過去證實SGK1於大白鼠空間學習記憶歷程中扮演重要角色，我們推測laminin β1與SGK Ser422的磷酸化有關，為確認laminin β1與SGK1之間的關係，我們同時轉染laminin β1 siRNA和SGK siRNA至海馬迴CA1區域，原先lami

nin β1促進大白鼠在水迷津空間學習與記憶的能力反而受到抑制。由於許多文獻指出mitogen-activated protein kinase /extracellular signal-regulated kinase (MAPK/ERK) 能整合不同訊息傳遞路徑進而調控基因的表現，對神經突觸的可塑性及記憶的形成是個重要分子，我們進一步探討laminin β1是否透過ERK1/2調控下游的SGK1進而影響大白鼠的空間記憶與學習。因此我們先轉染laminin β1 siRNA，48小時後再給予U0126 (MEK抑制劑) 以抑制MAPK/ERK的活性。結果顯示U0126會阻斷laminin

β1所引起SGK ser422的磷酸化。本篇研究提出laminin β1會參與哺乳類動物學習記憶的形成，同時也證實laminin β1會經由抑制ERK1/2及SGK1的活化進而抑制大白鼠空間學習與記憶的形成。

轉錄因子STAT1在大鼠空間學習與記憶形成的角色探討

為了解決ampa全名的問題，作者謝定佑 這樣論述：

STAT1是一個轉錄因子，在細胞生理功能中是非常重要的訊息傳遞者，在免疫系統具有抗病毒的角色，但是目前為止對於STAT1在中樞神經系統所扮演的角色仍不清楚。爲證實STAT1的表現與空間記憶的形成有關聯，我們將大白鼠分成兩組，一組為有訓練的組別，另一組則為無訓練的組別分別進行水迷津試驗，試驗完畢後取出大鼠的海馬迴CA1區域組織進行即時定量聚合酶連鎖反應與西方墨點法分析。結果顯示，經過水迷津訓練的刺激下，STAT1 mRNA與蛋白質分別減少約34 %及40 %，而STAT2 mRNA及蛋白質的表現則不受空間學習的影響。爲了進ㄧ步探討STAT1在空間學習記憶過程中所扮演的角色，實驗利用STAT1

siRNA轉染至海馬迴CA1區域抑制STAT1的表現，發現降低STAT1表現會促進大白鼠在水迷津試驗的學習能力，實驗同時也轉染STAT2 siRNA至CA1區域，結果顯示STAT2不參與大白鼠空間記憶的形成。本實驗室先前發現降低laminin β1表現量會促進大白鼠的空間學習記憶 (unpublished observation, 附錄二)，此外laminin β1基因啟動子上具有STAT1結合序列：interferon-γ activated site (GAS)。因此，實驗利用PC12細胞進行laminin β1報導基因分析，結果顯示STAT1會促進 laminin β1啟動子的轉錄活性。

而爲了進一步探討在STAT1影響空間學習與記憶歷程中與laminin β1的關聯性，實驗利用STAT1 siRNA抑制大白鼠海馬迴CA1區STAT1的表現並促進空間學習與記憶的同時，發現laminin β1 mRNA及蛋白質表現量都受到STAT siRNA的抑制，而轉染野生型STAT1-Flag質體則會增加laminin β1 mRNA及蛋白質的表現量，顯示STAT1正向調控laminin β1的表現。本篇論文提出海馬迴CA1區域的STAT1參與動物空間學習與記憶的形成，其中可能與STAT1正向調控laminin β1的表現有關。